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清新百合3

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 關(guān)于Real-time RT-PCR原理、操作過(guò)程及應(yīng)用

本人在做一個(gè)關(guān)于Real-time RT-PCR的實(shí)驗(yàn)

在網(wǎng)上查了一下Real-time RT-PCR的原理操作過(guò)程以及應(yīng)用

但都不是說(shuō)得很詳細(xì)

所以能不能請(qǐng)各位蟲(chóng)友知道的告知一下

ps：一定要是標(biāo)準(zhǔn)的解釋啊

謝謝了

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1樓 2012-10-09 16:39:29

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yanzimeng1

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金幣+10, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝參與 2013-03-14 09:37:23

大俠，我知道聚丙烯酰胺膠可以跑DNA也可以跑蛋白�？墒且话闱闆r下，如果你是做RT-PCR的話，好像都是用瓊脂糖跑的，還沒(méi)聽(tīng)說(shuō)用聚丙烯酰胺跑的。后者如果用于DNA，通常都是用來(lái)跑分子標(biāo)記的。而且如果你用來(lái)做REAL-TIME ，目的不就是想定量的么，用跑膠的技術(shù)，這個(gè)誤差很大�，F(xiàn)在基本都不做這個(gè)了，用的也都是熒光定量PCR儀器啊。反過(guò)來(lái)說(shuō)，如果沒(méi)有儀器，用跑膠的話，你跑瓊脂膠的效果才好，能夠調(diào)節(jié)每次加樣的量啊，如果用聚丙烯酰胺，出來(lái)的結(jié)果更不可信了，后者用來(lái)定性還可以，定量恐怕不行吧。
還有做分子實(shí)驗(yàn)么，難免接觸有毒的東西，小心點(diǎn)做好防護(hù)措施就是，沒(méi)其他的方法。注意保護(hù)自己，命最重要。

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7樓2012-10-20 21:17:30

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這個(gè)問(wèn)題太大了，答案要很長(zhǎng)的。而且有不同的方法，才能針對(duì)性的有相應(yīng)的操作要點(diǎn)。否則沒(méi)辦法講啊。

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2樓2012-10-19 21:34:43

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恩問(wèn)下您
您做DNA或者蛋白質(zhì)電泳時(shí)用的材料是聚丙烯酰胺嗎？

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3樓2012-10-19 23:05:27

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引用回帖:

2樓: Originally posted by yanzimeng1 at 2012-10-19 21:34:43
這個(gè)問(wèn)題太大了，答案要很長(zhǎng)的。而且有不同的方法，才能針對(duì)性的有相應(yīng)的操作要點(diǎn)。否則沒(méi)辦法講啊。

恩問(wèn)下您
您做DNA或者蛋白質(zhì)電泳時(shí)用的材料是聚丙烯酰胺嗎？

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4樓2012-10-20 11:59:23

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你做RT-PCR，應(yīng)該是跑完P(guān)CR，然后跑膠的吧？應(yīng)該是DNA么，跟蛋白什么關(guān)系呢？跑DNA用的是瓊脂糖啊。

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5樓2012-10-20 17:57:53

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5樓: Originally posted by yanzimeng1 at 2012-10-20 17:57:53
你做RT-PCR，應(yīng)該是跑完P(guān)CR，然后跑膠的吧？應(yīng)該是DNA么，跟蛋白什么關(guān)系呢？跑DNA用的是瓊脂糖啊。

額我是順道問(wèn)下
因?yàn)榕苣z的材料是聚丙烯酰胺
它既可以用于DNA也可以用于蛋白質(zhì)

額看來(lái) 你跑膠用的是瓊脂糖啊

我以為你用的是聚丙烯酰胺的

若你也用這個(gè) 那我就可以問(wèn)下關(guān)于對(duì)聚丙烯酰胺的處理了

因?yàn)榫郾０吩谝后w狀態(tài)下是有劇毒的
可能致癌
我是想問(wèn)下萬(wàn)一不小心弄到了怎么處理

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6樓2012-10-20 19:50:56

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silicare: 金幣+1, 不吃不喝不用手摸就沒(méi)問(wèn)題 2013-03-14 09:39:37

引用回帖:

7樓: Originally posted by yanzimeng1 at 2012-10-20 21:17:30
大俠，我知道聚丙烯酰胺膠可以跑DNA也可以跑蛋白�？墒且话闱闆r下，如果你是做RT-PCR的話，好像都是用瓊脂糖跑的，還沒(méi)聽(tīng)說(shuō)用聚丙烯酰胺跑的。后者如果用于DNA，通常都是用來(lái)跑分子標(biāo)記的。而且如果你用來(lái)做REAL-TI ...

大哥
偶是女生
聽(tīng)說(shuō)那個(gè)跑膠的緩沖液會(huì)造成女性不育
是不？

偶好害怕
現(xiàn)在還沒(méi)有結(jié)婚
更別提生孩子了

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8樓2012-10-20 21:43:40

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silicare: 金幣+3, 應(yīng)助指數(shù)+1, 在理 2013-03-14 09:39:52

MM，我是JJ. 我說(shuō)了，做分子實(shí)驗(yàn)的，沒(méi)有不接觸有毒的東西。關(guān)鍵是養(yǎng)成良好的習(xí)慣，你要做其他方面的實(shí)驗(yàn)也都有毒。想完全避開(kāi)，不可能。很多都是女同胞，不照樣結(jié)婚生子？沒(méi)你想想的那么嚴(yán)重，注意安全，但也不至于危言聳聽(tīng)。保重吧。

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9樓2012-10-20 22:07:31

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9樓: Originally posted by yanzimeng1 at 2012-10-20 22:07:31
MM，我是JJ. 我說(shuō)了，做分子實(shí)驗(yàn)的，沒(méi)有不接觸有毒的東西。關(guān)鍵是養(yǎng)成良好的習(xí)慣，你要做其他方面的實(shí)驗(yàn)也都有毒。想完全避開(kāi)，不可能。很多都是女同胞，不照樣結(jié)婚生子？沒(méi)你想想的那么嚴(yán)重，注意安全，但也不至于 ...

不是我聽(tīng)我本科的一個(gè)老師說(shuō)
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猜想可能是分子實(shí)驗(yàn)做多了
人體產(chǎn)生突變
然后影響了下一代

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10樓2012-10-20 22:25:55

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