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dongxiao1214新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
關(guān)于Real Time PCR 已有2人參與
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| 做定量PCR可以直接拿提取的基因組做模板嗎,為什么非要提取總RNA逆轉(zhuǎn)錄再擴(kuò)增呢? |
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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舉個(gè)簡(jiǎn)單的例子,假設(shè)你的基因在基因組有一個(gè)拷貝,轉(zhuǎn)錄出的RNA有一個(gè)拷貝;另一種條件下這個(gè)基因轉(zhuǎn)錄了2個(gè)拷貝。這樣算出來(lái)的話實(shí)際應(yīng)該是1:2(反轉(zhuǎn)錄出的1和2個(gè)拷貝),而用基因組的話則是1:1(基因組各有一個(gè)拷貝,RNA不能作為DNA聚合酶的模板)。 也就是說(shuō)基因組的拷貝會(huì)影響轉(zhuǎn)錄量,這也就是為什么要先去DNA在反轉(zhuǎn)錄。同時(shí)RNA不能做RT的模板。 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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