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xuyan_1215新蟲 (小有名氣)
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[求助]
α-淀粉酶基因表達(dá)問題
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各位蟲友,本人最近在做α-淀粉酶基因的表達(dá),遇到了如下問題: (1)表達(dá)載體為PET-28a,表達(dá)宿主菌為BL21,外源基因已經(jīng)通過測序驗(yàn)證連接到載體上了,檢測酶活是發(fā)現(xiàn),發(fā)酵液中有酶活但是胞內(nèi)沒有酶活,這是怎么回事呢?按理說應(yīng)該是表達(dá)在胞內(nèi)的呀? (2)空白對(duì)照(JM109含有空載體)的發(fā)酵液中也有酶活??? ps:我都用IPTG誘導(dǎo)的,是不是說明菌種本身就能表達(dá)這種淀粉酶呢? 都要愁死了。。。 |
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