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zhuzhuba1銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
PCR提總RNA時(shí)，最后溶于DEPC水時(shí)有沉淀，不能完全溶解，是什么原因，能怎么補(bǔ)救
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| 大鼠足爪樣本，同樣取兩個(gè)樣本，同樣條件，最后，一個(gè)樣本在溶于DEPC水時(shí)有白色沉淀，稍一放置就分層，上層很透明，下層白色沉淀，之前在加異丙醇時(shí)沉淀就稍大，最后260/280的比值只有1.4，濃度300多，現(xiàn)在的關(guān)鍵問(wèn)題是我沒(méi)時(shí)間再做一批動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，有沒(méi)有什么補(bǔ)救措施，再出現(xiàn)這種情況 |
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wxl007777
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2012-10-20 09:14:34
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+2, 謝謝分享經(jīng)驗(yàn) 2012-10-20 08:03:51
看天: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 常來(lái) 2012-10-23 17:30:31
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看天: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 常來(lái) 2012-10-23 17:30:31
| 沒(méi)做過(guò)動(dòng)物的，但是我做過(guò)植物的，不過(guò)道理應(yīng)當(dāng)是一樣的。你可以把這批樣品重新純化一下，也就是重新用氯仿等按步驟重新抽提。你這樣的應(yīng)該是RNA中有不溶性的物質(zhì)。另外在重新抽提的時(shí)候可以加大體系，也就是你的RNA如果溶解在100微升的水中，那么可以再加些DEPC水進(jìn)去，把體系變大。這樣在加入抽提劑純化的時(shí)候，RNA損失量要小些。我提取植物RNA的時(shí)候碰到過(guò)這種情況，不知道對(duì)你的實(shí)驗(yàn)是否合適，可以試試。希望能幫到你。 |
2樓2012-10-19 19:37:32
zhuzhuba1
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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4樓2012-10-22 20:03:50
Everpower
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5樓2012-10-23 10:44:07
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