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a71840584

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 植物MDA和POD測(cè)定問(wèn)題

首先POD，我最高濃度處理組的吸光度值升高太快，我30s讀一次數(shù)，但2min30s的時(shí)候數(shù)據(jù)就已經(jīng)升到最大了（3.0000），這代表什么？是不是應(yīng)該少加點(diǎn)酶液？（我只加了20μl）,前面的數(shù)據(jù)應(yīng)該還能用吧？
再說(shuō)MDA，我問(wèn)過(guò)這個(gè)問(wèn)題了，就是測(cè)MDA的時(shí)候需不需要加TCA研磨，我也知道加TCA研磨好，但是也有一部分不加的，見(jiàn)過(guò)好多，文獻(xiàn)，碩士論文，博士論文都有，他們大多都參考林值芳（1984），我想問(wèn)的是如果我只是想看一下不同處理組MDA的變化趨勢(shì)，不是非常準(zhǔn)確的測(cè)定一下MDA的含量，而且有對(duì)照做參比，是不是可以不加TCA研磨？直接就取酶液加TBA（里面也含TCA）高溫反應(yīng)后測(cè)定。之所以想這么做是因?yàn)樘幚磔^多，指標(biāo)較多，要一天測(cè)完，樣品也不大夠用。如果不需要加TCA的話可以和抗氧化酶用同一個(gè)酶液，這樣只研磨一次，只測(cè)一次蛋白，節(jié)省好多時(shí)間。是否可行請(qǐng)高手指點(diǎn)。

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再牛逼的肖邦也彈不出哥的憂傷。。。

1樓 2012-10-24 16:56:26

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starseacow

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gyfgood: 金幣+10, 。。。很好，很有幫助！樓主，參考交流！ 2012-10-24 23:35:23
a71840584: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-10-28 18:55:32

1 你可以修改測(cè)定系統(tǒng)中添加的樣品量，獲得結(jié)果后按照你之前測(cè)定的對(duì)應(yīng)蛋白含量計(jì)算即可。對(duì)于一般的分光光度計(jì)，太大的值并不準(zhǔn)確，一般可信范圍是0.3-0.8，我自己做實(shí)驗(yàn)測(cè)定酶活時(shí)放寬點(diǎn)，一般也不大于2.
2 加TCA，這樣結(jié)果比較穩(wěn)定，重現(xiàn)性和精密度都會(huì)比較好。就我看過(guò)的幾個(gè)可信的方法原始報(bào)道，還是加TCA的，不要偷懶，想發(fā)好文章的話，中文文獻(xiàn)報(bào)道不可盡信。

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2樓2012-10-24 17:46:10

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