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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 動植物 » 綜合其他 » 植物MDA和POD測定問題
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[求助]
植物MDA和POD測定問題
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首先POD，我最高濃度處理組的吸光度值升高太快，我30s讀一次數(shù)，但2min30s的時候數(shù)據(jù)就已經(jīng)升到最大了（3.0000），這代表什么？是不是應該少加點酶液？（我只加了20μl）,前面的數(shù)據(jù)應該還能用吧？ 再說MDA，我問過這個問題了，就是測MDA的時候需不需要加TCA研磨，我也知道加TCA研磨好，但是也有一部分不加的，見過好多，文獻，碩士論文，博士論文都有，他們大多都參考林值芳（1984），我想問的是如果我只是想看一下不同處理組MDA的變化趨勢，不是非常準確的測定一下MDA的含量，而且有對照做參比，是不是可以不加TCA研磨？直接就取酶液加TBA（里面也含TCA）高溫反應后測定。之所以想這么做是因為處理較多，指標較多，要一天測完，樣品也不大夠用。如果不需要加TCA的話可以和抗氧化酶用同一個酶液，這樣只研磨一次，只測一次蛋白，節(jié)省好多時間。是否可行請高手指點。 |
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1 你可以修改測定系統(tǒng)中添加的樣品量，獲得結果后按照你之前測定的對應蛋白含量計算即可。對于一般的分光光度計，太大的值并不準確，一般可信范圍是0.3-0.8，我自己做實驗測定酶活時放寬點，一般也不大于2. 2 加TCA，這樣結果比較穩(wěn)定，重現(xiàn)性和精密度都會比較好。就我看過的幾個可信的方法原始報道，還是加TCA的，不要偷懶，想發(fā)好文章的話，中文文獻報道不可盡信。 |
2樓2012-10-24 17:46:10
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