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水藍(lán)兒907新蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白酶的提取
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急需�。�！ 想要問大家一下： 從水產(chǎn)品中提取蛋白酶的方法？ 提取之前是否還需要進(jìn)行脫脂？脫脂的作用？ 丙酮沉淀法的具體步驟？ 酶活若很低的話如何改進(jìn)？及低酶活的應(yīng)用？ 謝謝大家�。�！ |
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roydxy
金蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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首先細(xì)胞破碎，使目的蛋白溶解于緩沖液中 第二步，用硫酸銨，或者有機(jī)溶劑（如乙醇、丙酮）等沉淀蛋白——也包括核酸等大分子 第三步，收取沉淀并復(fù)溶，用硫酸銨沉淀的需要透析，用有機(jī)溶劑沉淀的需初步凈化（如硅藻土過濾，微膜過濾等），然后就獲得了粗酶。 丙酮現(xiàn)在已不提倡使用的了。乙醇的效果差不多，最好別用丙酮。 提蛋白酶前，我的意見是不用脫脂，否則會導(dǎo)致酶活的降低。 若是酶活很低，有多種情況：如細(xì)胞破碎不完全、提取效率低、酶在提取過程中失活等，需要具體情況具體分析 祝：順利 |
2樓2012-10-29 09:20:28
gezilin1862
金蟲 (小有名氣)
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3樓2012-10-29 17:31:14
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