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iris871110新蟲 (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母發(fā)酵問題求助
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| 本人做重組畢赤酵母表達木聚糖酶，所用表達系統(tǒng)為GS115和pPIC9K，重組子為Mut+型。2.5升發(fā)酵罐，BSM培養(yǎng)基，在流加甲醇時遇到問題。我的溶氧曲線不降，剛流加速度為3ml/h/l時溶氧在62%基本穩(wěn)定，隨后逐漸增加到6ml/h/和9ml/h/，溶氧不降且緩慢上升至74%。誘導(dǎo)12個小時測酶活是600U/mL,鏡檢菌體有部分死亡的現(xiàn)象，而且pH值一直在6，沒有氨水的調(diào)節(jié)。想問問各位有沒有相關(guān)實驗經(jīng)驗，主要是溶氧曲線為什么不降？謝謝 |
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a404467415
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2樓2012-11-01 08:46:12
iris871110
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3樓2012-11-08 23:08:27
【答案】應(yīng)助回帖
hsd3521: 應(yīng)助指數(shù)+1 2012-12-11 07:21:59
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基于以上兩位對畢赤酵母甲醇誘導(dǎo)階段問題的表述，個人覺得是兩位對甲醇流加的速率控制和畢赤酵母利用甲醇能力偏差太大，所以導(dǎo)致發(fā)酵罐內(nèi)甲醇濃度太高，或者太低，都導(dǎo)致酵母出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。 一般誘導(dǎo)階段剛開始的幾個小時，要緩慢的增加甲醇流加量，這樣酵母就可以及時產(chǎn)生醇氧化酶，就會消耗多一點的甲醇。如果甲醇流加速率增加太快，酵母還沒有來得及產(chǎn)生足量的醇氧化酶，過量的甲醇就把畢赤酵母毒死了（毒死是因為甲醇是有機小分子，對細胞有很強的滲透作用，對細胞壁也有不利的作用）。 希望能幫到你們 |
4樓2012-12-06 23:36:05
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5樓2015-05-12 14:17:20
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6樓2016-09-18 13:28:51
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