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iris871110新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母發(fā)酵問(wèn)題求助
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| 本人做重組畢赤酵母表達(dá)木聚糖酶，所用表達(dá)系統(tǒng)為GS115和pPIC9K，重組子為Mut+型。2.5升發(fā)酵罐，BSM培養(yǎng)基，在流加甲醇時(shí)遇到問(wèn)題。我的溶氧曲線不降，剛流加速度為3ml/h/l時(shí)溶氧在62%基本穩(wěn)定，隨后逐漸增加到6ml/h/和9ml/h/，溶氧不降且緩慢上升至74%。誘導(dǎo)12個(gè)小時(shí)測(cè)酶活是600U/mL,鏡檢菌體有部分死亡的現(xiàn)象，而且pH值一直在6，沒(méi)有氨水的調(diào)節(jié)。想問(wèn)問(wèn)各位有沒(méi)有相關(guān)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，主要是溶氧曲線為什么不降？謝謝 |
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iris871110
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3樓2012-11-08 23:08:27
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2樓2012-11-01 08:46:12
【答案】應(yīng)助回帖
hsd3521: 應(yīng)助指數(shù)+1 2012-12-11 07:21:59
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基于以上兩位對(duì)畢赤酵母甲醇誘導(dǎo)階段問(wèn)題的表述，個(gè)人覺(jué)得是兩位對(duì)甲醇流加的速率控制和畢赤酵母利用甲醇能力偏差太大，所以導(dǎo)致發(fā)酵罐內(nèi)甲醇濃度太高，或者太低，都導(dǎo)致酵母出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。 一般誘導(dǎo)階段剛開(kāi)始的幾個(gè)小時(shí)，要緩慢的增加甲醇流加量，這樣酵母就可以及時(shí)產(chǎn)生醇氧化酶，就會(huì)消耗多一點(diǎn)的甲醇。如果甲醇流加速率增加太快，酵母還沒(méi)有來(lái)得及產(chǎn)生足量的醇氧化酶，過(guò)量的甲醇就把畢赤酵母毒死了（毒死是因?yàn)榧状际怯袡C(jī)小分子，對(duì)細(xì)胞有很強(qiáng)的滲透作用，對(duì)細(xì)胞壁也有不利的作用）。 希望能幫到你們 |
4樓2012-12-06 23:36:05
dxh011
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5樓2015-05-12 14:17:20
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