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wei_suzhen新蟲 (小有名氣)
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[求助]
感受態(tài)細胞制備 已有1人參與
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| 用氯化鈣制備感受態(tài)細胞時，怎樣避免污染？注意事項是什么? |
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huangguoqing
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-10-31 15:16:14
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個人意見，僅供參考！ 1.氯化鈣最好現(xiàn)用現(xiàn)配，盡量別用高溫滅菌，過濾更好； 2.像你養(yǎng)細菌一樣，注意就好，比如盡量不要手在瓶口上方活動，要用的東西放在一個地方，用過的地方放在另一個地方等等； 3.其實一般情況下，做感受態(tài)不會染菌的，就算染了，之后你用感受態(tài)做轉(zhuǎn)化的時候也會被選擇培養(yǎng)基平板的抗生素殺滅掉，這之前感受態(tài)都是放在超低溫冰箱中的，雜菌也長不了；這溫度要是真長了雜菌，麻煩把那個雜菌給我發(fā)一份，不勝感激！  4.像樓上說的，實踐出真知，做幾次就知道該注意哪些了。 |
7樓2012-10-31 11:54:02
cloudwin
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1，氯化鈣滅菌 2，在超凈臺中操作 3，各個步驟小心。 其實很多實驗室都不是很仔細，如果你自己做一次成功了，你就知道怎么樣了，知道注意事項了。實踐中學(xué)，剛剛開始的顧慮和疑問就自然而然的消失了。祝順利。 |
wei_suzhen2樓2012-10-31 01:36:13
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我個人做下來感覺是快與冷是最重要的，反而染菌是罕見的情況…… 只要你搖的種子液沒污染，基本上就不會污染，LB里面沒有多少菌能競爭過大腸桿菌的。 影響效率的關(guān)鍵就在于配溶液的時候容器要洗干凈，水用干凈的水，盡量快地完成菌體洗滌分裝凍存的步驟。 |
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8樓2012-10-31 17:06:04
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10樓2012-11-01 09:36:45
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