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biolio2009木蟲 (著名寫手)
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[求助]
請(qǐng)從事過(guò)葡聚糖、木聚糖的提取研究工作的回答一下 已有2人參與
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本人最近遇到的麻煩是——提取出來(lái)的多糖干燥后再溶解發(fā)現(xiàn)能與DNS反應(yīng)呈現(xiàn)很重的顏色,請(qǐng)問(wèn)是不是提取物中有還原糖?如何才能除掉 這些還原糖?用什么方法啊? 還有就是怎么才能確定我提取的這個(gè)就是我要的目的產(chǎn)物(即就是用什么方法測(cè)試) 期待各位老師、前輩給回答下,本人不甚感激。多謝了先 |
木蟲 (著名寫手)
金蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
至尊木蟲 (著名寫手)
正股級(jí)巡視員
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首先,1、想要去除還原糖,可以選擇透析的方式,選擇節(jié)流分子量在8000-12000之間的就可以;2、想要確定是否是你的目的產(chǎn)物,可以分別用將透析、凍干后的多糖溶解分別測(cè)定多糖含量(硫酸苯酚法)、蛋白質(zhì)含量(考馬斯亮藍(lán)法)、醛酸基含量和硫酸基含量(這個(gè)在你的麩皮多糖中含量較高),然后配置1mg/mL的多糖溶液用HPLC進(jìn)行檢測(cè)多糖分子量和均一度(竹子的選擇可以選擇日本TOSHO公司的多款多糖色譜柱,價(jià)格在10000/根),檢測(cè)器可以用蒸發(fā)光散射(ELSD)和示差折光檢測(cè)器(RID),如果有條件還可以聯(lián)用二極管陣列檢測(cè)器(DAD)確定連綿是否有蛋白質(zhì)或者色素成分 帶這些工作結(jié)束在選擇合適的離子交換和分子篩色譜多粗多糖進(jìn)行分離純化。 希望對(duì)你有用 |

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