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cfaaa4460新蟲 (初入文壇)
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石蠟C18H38 是否進(jìn)入到了木材細(xì)胞壁中
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大家好！我這里有用石蠟處理過的木材，需要確定石蠟是否進(jìn)入到了木材的細(xì)胞壁中。請(qǐng)推薦方法。木材細(xì)胞壁的微孔尺寸在幾個(gè)納米級(jí)。我一外行，折騰著嘗試了很久了，請(qǐng)大家不吝賜教！ 染色是目前在嘗試的方法。 木材為極性材料，石蠟為非極性材料。有人推薦用兩種熒光劑染色，一種極性熒光劑，一種非極性熒光劑。請(qǐng)教那些是極性熒光劑，哪些是非極性熒光劑。哪些算極性染料，哪些算非極性染料？我一下子用兩種染料上去，對(duì)木材和石蠟分別染色，然后浸注石蠟入木材，這樣可以嗎？ 試用了幾種染料，都不合適。請(qǐng)推薦可以確定石蠟是否進(jìn)入到了木材的細(xì)胞壁中的方法，染色的染料和方法，萬分感謝！ 同時(shí)在找自身帶顏色的石蠟，就是石蠟身上掛上個(gè)什么基團(tuán)能夠顯示顏色的物質(zhì)，不知道有沒有這種已經(jīng)合成好的物質(zhì)可以用。 懇請(qǐng)大家?guī)兔Γ∪f分感謝！解決問題金幣贈(zèng)送。 [ Last edited by cfaaa4460 on 2012-11-9 at 07:17 ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhoupeng87: 金幣+5, 應(yīng)助指數(shù)+1, 歡迎交流 2013-07-15 07:51:35
zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
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zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
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Q1. 需要確定石蠟是否進(jìn)入到了木材的細(xì)胞壁中. A1. 聽起來象是做顯微鏡石蠟切片標(biāo)本. 建議參考一下植物顯微鏡切片標(biāo)本制做的書籍. 這才是關(guān)鍵中的關(guān)鍵, 因?yàn)槟岢龅膯栴}這些寫書的老前輩全都遇過. 木材為極性材料，石蠟為非極性材料。有人推薦用兩種熒光劑染色，一種極性熒光劑，一種非極性熒光劑。 Q2. 請(qǐng)教那些是極性熒光劑，哪些是非極性熒光劑。哪些算極性染料，哪些算非極性染料？ A2. 這樣說好了, 杯子里裝了無色透明的水與煤油, 加一點(diǎn)熒光染料下去攪拌. 會(huì)讓杯底水層呈現(xiàn)熒光的就是極性熒光染料象是熒光黃(Fluorescein)黃綠色熒光, 羅丹明(Rhodamine)粉紅~黃色熒光, 會(huì)讓杯面油層呈現(xiàn)熒光的就是非極性熒光染料象是蒽（anthracene）藍(lán)熒光, 香豆素(Coumarin)藍(lán)熒光, 芘（pyrene) Q3. 我一下子用兩種染料上去，對(duì)木材和石蠟分別染色，然后浸注石蠟入木材，這樣可以嗎？ A3. 染色是為了判斷切片組織斷面的極性分布. 所以最好是在石蠟化完成之后, 把木材樣本切片短暫的浸泡在中等極性染浴 (e.g. 70% 丙酮:芘（pyrene), 30%水:熒光黃(Fluorescein))三十秒, 然后用70%酒精漂洗 3~5秒*3次把多余染劑洗去, 然后拿到熒光顯微鏡底下照相判讀影像. 預(yù)期的結(jié)果是木材細(xì)胞壁呈紅黃色, 石蠟呈藍(lán)色. 沒有熒光顯微鏡的話就用普通光學(xué)顯微鏡吧, 預(yù)期的結(jié)果是木材細(xì)胞壁呈粉紅色, 石蠟呈無色. P.S.1如果沒有熒光顯微鏡, 那么也不一定非要使用非極性熒光染料, 很多分散染料都是非極性的, 不妨考慮看看. P.S.2 生物有個(gè)體差異, 所以生物實(shí)驗(yàn)的不確定性頗大. 這代表每次實(shí)驗(yàn)需要正面對(duì)照組(positive control) -- 細(xì)胞壁經(jīng)過苯甲酰氯酯化變成非極性表面, 負(fù)面對(duì)照組(negative control)細(xì)胞壁經(jīng)過漂白水氧化變成極性表面, 未處理組(un-treated), 處理組(treated) 這可能是個(gè)有趣的計(jì)劃, 祝您好運(yùn). |
4樓2013-07-15 07:47:21
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2樓2012-11-23 10:58:16
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3樓2012-11-23 11:00:45
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