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cfaaa4460新蟲 (初入文壇)
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[求助]
石蠟C18H38 是否進入到了木材細胞壁中
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大家好！我這里有用石蠟處理過的木材，需要確定石蠟是否進入到了木材的細胞壁中。請推薦方法。木材細胞壁的微孔尺寸在幾個納米級。我一外行，折騰著嘗試了很久了，請大家不吝賜教！ 染色是目前在嘗試的方法。 木材為極性材料，石蠟為非極性材料。有人推薦用兩種熒光劑染色，一種極性熒光劑，一種非極性熒光劑。請教那些是極性熒光劑，哪些是非極性熒光劑。哪些算極性染料，哪些算非極性染料？我一下子用兩種染料上去，對木材和石蠟分別染色，然后浸注石蠟入木材，這樣可以嗎？ 試用了幾種染料，都不合適。請推薦可以確定石蠟是否進入到了木材的細胞壁中的方法，染色的染料和方法，萬分感謝！ 同時在找自身帶顏色的石蠟，就是石蠟身上掛上個什么基團能夠顯示顏色的物質(zhì)，不知道有沒有這種已經(jīng)合成好的物質(zhì)可以用。 懇請大家?guī)兔�！萬分感謝！解決問題金幣贈送。 [ Last edited by cfaaa4460 on 2012-11-9 at 07:17 ] |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
zhoupeng87: 金幣+5, 應助指數(shù)+1, 歡迎交流 2013-07-15 07:51:35
zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
zhoupeng87: 金幣+5, 應助指數(shù)+1, 歡迎交流 2013-07-15 07:51:35
zhoupeng87: FC-EPI+1 2013-07-15 07:51:44
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Q1. 需要確定石蠟是否進入到了木材的細胞壁中. A1. 聽起來象是做顯微鏡石蠟切片標本. 建議參考一下植物顯微鏡切片標本制做的書籍. 這才是關(guān)鍵中的關(guān)鍵, 因為您提出的問題這些寫書的老前輩全都遇過. 木材為極性材料，石蠟為非極性材料。有人推薦用兩種熒光劑染色，一種極性熒光劑，一種非極性熒光劑。 Q2. 請教那些是極性熒光劑，哪些是非極性熒光劑。哪些算極性染料，哪些算非極性染料？ A2. 這樣說好了, 杯子里裝了無色透明的水與煤油, 加一點熒光染料下去攪拌. 會讓杯底水層呈現(xiàn)熒光的就是極性熒光染料象是熒光黃(Fluorescein)黃綠色熒光, 羅丹明(Rhodamine)粉紅~黃色熒光, 會讓杯面油層呈現(xiàn)熒光的就是非極性熒光染料象是蒽（anthracene）藍熒光, 香豆素(Coumarin)藍熒光, 芘（pyrene) Q3. 我一下子用兩種染料上去，對木材和石蠟分別染色，然后浸注石蠟入木材，這樣可以嗎？ A3. 染色是為了判斷切片組織斷面的極性分布. 所以最好是在石蠟化完成之后, 把木材樣本切片短暫的浸泡在中等極性染浴 (e.g. 70% 丙酮:芘（pyrene), 30%水:熒光黃(Fluorescein))三十秒, 然后用70%酒精漂洗 3~5秒*3次把多余染劑洗去, 然后拿到熒光顯微鏡底下照相判讀影像. 預期的結(jié)果是木材細胞壁呈紅黃色, 石蠟呈藍色. 沒有熒光顯微鏡的話就用普通光學顯微鏡吧, 預期的結(jié)果是木材細胞壁呈粉紅色, 石蠟呈無色. P.S.1如果沒有熒光顯微鏡, 那么也不一定非要使用非極性熒光染料, 很多分散染料都是非極性的, 不妨考慮看看. P.S.2 生物有個體差異, 所以生物實驗的不確定性頗大. 這代表每次實驗需要正面對照組(positive control) -- 細胞壁經(jīng)過苯甲酰氯酯化變成非極性表面, 負面對照組(negative control)細胞壁經(jīng)過漂白水氧化變成極性表面, 未處理組(un-treated), 處理組(treated) 這可能是個有趣的計劃, 祝您好運. |
4樓2013-07-15 07:47:21
nanzhanshi2
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2樓2012-11-23 10:58:16
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3樓2012-11-23 11:00:45
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