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噬菌體篩選(負(fù)篩)
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求助噬菌體篩選的高手,我現(xiàn)在在用Fc融合蛋白從噬菌體抗體庫中篩選,采用96孔板篩選方法,每輪篩選時用Fc蛋白37℃先與抗體庫孵育一個小時,然后把孵育后的phage與融合蛋白37℃孵育2小時。 采用的洗滌強(qiáng)度是第一輪5遍,第一遍吹打5次后靜置5分鐘;第二輪抗原量降了一半,同時洗滌強(qiáng)度增加到10次;結(jié)果第二輪篩選的滴度下降太快了,測滴度時,10的5次方的板子沒有長出來。 我想問一下大家,你們做酶條篩選的時候,洗滌強(qiáng)度和抗原包被量是怎么變化的?謝謝高手指教! |
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