 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3034 | 回復(fù): 25 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
758836596銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
蛋白刺激RAW264.7，Elisa檢測TNF-α的釋放
|
|
| 我用蛋白刺激RAW264.7，24h之后Elisa檢測TNF-α的釋放，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陰性對照也就是只往細(xì)胞里加PBS而不加蛋白刺激，竟然可以檢測到大量的TNF-α的釋放，請做過這種實(shí)驗(yàn)的老師給指導(dǎo)一下吧，謝謝了！我培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基里面加入了血清，會(huì)不會(huì)是因?yàn)檫@個(gè)原因��？跟細(xì)胞的狀態(tài)有關(guān)系嗎？或者是和鋪板的細(xì)胞數(shù)太多有關(guān)系？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
329求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料求調(diào)劑一志愿哈工大324
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
083000學(xué)碩274求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
291求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿廈門大學(xué)化學(xué)學(xué)碩307求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求用ELISA測定肝組織中TNF-α，IL-6的方法
已經(jīng)有7人回復(fù)
藍(lán)天_1988
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 22 (小學(xué)生)
- 金幣: 1306
- 散金: 400
- 紅花: 11
- 帖子: 187
- 在線: 314.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1495948
- 注冊: 2011-11-17
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
4樓2012-11-20 17:02:49
藍(lán)天_1988
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 22 (小學(xué)生)
- 金幣: 1306
- 散金: 400
- 紅花: 11
- 帖子: 187
- 在線: 314.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1495948
- 注冊: 2011-11-17
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
758836596: 金幣+2, ★有幫助 2012-11-20 13:44:35
wizardfan: 金幣+3, 感謝細(xì)致的分析 2012-12-24 08:59:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
758836596: 金幣+2, ★有幫助 2012-11-20 13:44:35
wizardfan: 金幣+3, 感謝細(xì)致的分析 2012-12-24 08:59:02
|
1、血清里面有很多刺激因素，一般實(shí)驗(yàn)時(shí)都需要饑餓一段時(shí)間（即用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)；時(shí)間根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)情況定，可以查查相關(guān)文獻(xiàn)）； 2、細(xì)胞量要保證板與板之間沒有差別； 3、如果做到上述1、2后還是control不成立的話，需要做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)(檢測所用溶劑中是否合格，尤其是水)了。 |
2樓2012-11-19 17:49:50
758836596
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 169.7
- 帖子: 47
- 在線: 25.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1864623
- 注冊: 2012-06-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
3樓2012-11-20 13:48:35
寧夏8083
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 6460.6
- 紅花: 4
- 帖子: 679
- 在線: 267.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 664804
- 注冊: 2008-11-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤免疫
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
看天: 金幣+4, 鼓勵(lì) 常來 2012-11-20 21:02:34
758836596: 金幣+4, ★有幫助 2012-11-21 13:35:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
看天: 金幣+4, 鼓勵(lì) 常來 2012-11-20 21:02:34
758836596: 金幣+4, ★有幫助 2012-11-21 13:35:55
|
我覺得問題是這樣的： 1 你先檢測一下PBS和培養(yǎng)基，里面是不是含有內(nèi)毒素，這個(gè)可以用鱟試劑檢測，市面上賣的很多，不貴，大約100元/盒吧。因?yàn)镽AW264.7 對內(nèi)毒素（LPS）比較敏感，我們實(shí)驗(yàn)室原來做的時(shí)候都是用內(nèi)毒素-free的水； 2 鋪板的時(shí)候，細(xì)胞數(shù)量很重要的，太多了有死細(xì)胞也會(huì)引起培養(yǎng)體系的改變，導(dǎo)致內(nèi)源性的TNF增多； 3 可以鋪板的時(shí)候用正常量的血清，隨后貼壁好，換用無血清的培養(yǎng)基饑餓一段，我們叫同步化，使細(xì)胞都處于同一個(gè)細(xì)胞周期，這樣背景比較均一，這個(gè)在細(xì)胞周期試驗(yàn)中比較常用。 4 剩下的就是實(shí)驗(yàn)操作過程中的細(xì)心了。不可能對照組比處理組都高，還是哪些細(xì)節(jié)沒有注意到吧。 |
5樓2012-11-20 18:40:18
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +10 | PolarBear11 2026-03-26 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +9 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +5 | 麻辣魷魚 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +8 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085602 化工專碩 338分 求調(diào)劑 +10 | 路癡小琪 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分 +6 | 辰沐5211314 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | Pigcasso 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 劉柯@ 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求調(diào)劑 +4 | gdlf9999 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料與化工303分求調(diào)劑 +4 | 為學(xué)666 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 食品專碩 一志愿雙一流 328 +3 | xiaom99 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +3 | 濤濤Wjt 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩301分求調(diào)劑 +7 | Liyouyumairs 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|