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stmoon新蟲 (初入文壇)
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[求助]
紫外法測定CAT活性
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| 最近要測定CAT活性,看到很多人是采用在240nm下進行測定。具體如果確定究竟用多長時間的呢?看網(wǎng)上說要數(shù)據(jù)要用直線的那一段,可是我做出來的數(shù)據(jù)完全沒有規(guī)律。另外就是發(fā)現(xiàn)在測定的過程中,會產(chǎn)生很多的氣泡,是搖勻的過程中產(chǎn)生的呢,還是因為發(fā)生了雙氧水分解產(chǎn)生的水和氧氣呢?氣泡會對測定的OD值產(chǎn)生影響嗎?期盼做過實驗的高手指導(dǎo)指導(dǎo)。 |
| “H2O2在240nm波長下有強烈吸收,過氧化氫酶能分解過氧化氫,使反應(yīng)溶液吸光度(A240)隨反應(yīng)時間而降低。根據(jù)測量吸光率的變化速度即可測出過氧化氫酶的活性。”我沒有做過只是本科時畢業(yè)設(shè)計一個宿舍的同學(xué)做的,就幫著其做的。記得是在黑暗狀態(tài)下,就是屋子窗簾都拉上,然后在比色皿中添加光氧化氫迅速蓋上暗盒開始計時測定,計時讀數(shù)。氣泡有影響但是盡量減少,是雙氧水分解產(chǎn)生的。同學(xué)做的數(shù)據(jù)還是很有規(guī)律的。 |
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