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海闊天空102木蟲 (正式寫手)
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適配體 aptamer 與分析物相互作用相關(guān)
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適配體aptamer 如何能有效的與分析物結(jié)合，例如VEGF165與VEGF165 aptamer 有效結(jié)合需要注意哪些條件？比如溫度，ph，離子強度， 這與抗體與抗原的相互作用有什么主要區(qū)別？ 如何讓適配體高效結(jié)合分析物呢？ |
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4樓2012-11-20 18:08:28
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5樓2012-11-21 19:38:24
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6樓2012-11-27 08:51:34
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7樓2012-11-30 10:17:53
【答案】應助回帖
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海闊天空102: 金幣+15, ★★★很有幫助 2012-12-03 23:06:24
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適配體aptamer 與分析物有效結(jié)合的有效結(jié)合取決于它們之間本身的親和性（例如解離常數(shù)或結(jié)合常數(shù)）；以及所用的buffer 種類 pH 鹽離子濃度等外部條件。 親和性可以通過文獻所報道的獲得，像ATP與其DNA aptamer解離常數(shù)在微摩爾級，所以要想觀察到明顯的結(jié)合，ATP需要在毫摩爾級的濃度。VEGF與aptamer親和性在100納摩爾左右，VEGF的濃度可能要到微摩爾級了。此外，VEGF是蛋白質(zhì)，需要防止其變性。 實驗緩沖條件可以參考其原始文獻，即樓上所提到的篩選條件。 如果aptamer是固定在表面上，可能還會在很大程度上減弱其與分析物的親和性。影響的減弱在于連接臂的設(shè)計、在表面固定的密度等。 |
8樓2012-12-02 20:15:15
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