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mgrll新蟲 (初入文壇)
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微生物發(fā)酵加入底物后沒(méi)有產(chǎn)物為什么？
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| 微生物發(fā)酵加入底物后沒(méi)有產(chǎn)物為什么？ |
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2樓2012-11-26 16:48:16
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+2, 鼓勵(lì)參與應(yīng)助 2012-11-27 10:56:52
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laozuzunzhe: 金幣+2, 鼓勵(lì)參與應(yīng)助 2012-11-27 10:56:52
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樓主，大概可以從一下多方面反思自己的實(shí)驗(yàn)： 1、確認(rèn)菌體活性：看OD變化；取發(fā)酵中樣（盡量無(wú)菌）涂布看看生長(zhǎng)情況是否如期望。 2、確認(rèn)菌體：確認(rèn)基因型、所表達(dá)的載體；確認(rèn)無(wú)混菌、染菌現(xiàn)象（這個(gè)可以既用梯度稀釋涂布法，觀察菌落形態(tài)；也可以鏡檢）。 3、以上都無(wú)誤時(shí)，還可以從載體是否表達(dá)（誘導(dǎo)成功否）；產(chǎn)物的檢測(cè)是否正確；發(fā)酵條件是否得當(dāng)（初始底物濃度偏高or低？PH是否合適產(chǎn)品的獲得；是否缺少某種添加物）；接種量是否應(yīng)該加大（將100ml的種子，8000rpm離心，洗一遍，用5ml吹打起來(lái)，接入罐子等等做法） 4、祝實(shí)驗(yàn)順利，bb拿來(lái)~~  |
5樓2012-11-26 20:37:09
kingleo99
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【答案】應(yīng)助回帖
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laozuzunzhe: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-11-27 10:57:21
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原因很多 1、是不是染雜菌了，雜菌生命力旺盛，你的菌種會(huì)衰退致死亡，所以沒(méi)有產(chǎn)物。 2、無(wú)菌正常，如果是自然界篩選的菌種，一般是培養(yǎng)基不合適，或底物不對(duì)、或量不對(duì)、發(fā)酵PH不對(duì)、或加的時(shí)間不對(duì)，這種情況一般會(huì)或多或少有點(diǎn)產(chǎn)物，倒霉時(shí)可能真一點(diǎn)就沒(méi)有。總之這種情況要在發(fā)酵工藝調(diào)控上下大工夫。 3、工程菌：如果是胞內(nèi)，可能是誘導(dǎo)劑量或時(shí)機(jī)不對(duì)、離子濃度不對(duì)、發(fā)酵PH不對(duì)，或碳氮源比例不對(duì)等。這種情況一般會(huì)或多或少有點(diǎn)產(chǎn)物，倒霉時(shí)可能真一點(diǎn)就沒(méi)有。 4、工程菌：如果是胞外蛋白產(chǎn)物，這種情況得不到產(chǎn)物的可能很大。不管是大腸桿菌還是酵母，只要代謝途徑發(fā)生大的偏移，導(dǎo)致胞內(nèi)的酶分泌到胞外，或代謝異常，產(chǎn)生能夠破壞產(chǎn)物的酶，就一點(diǎn)也得不到產(chǎn)物蛋白。 |
8樓2012-11-27 10:11:54
9樓2012-11-27 13:20:04
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