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yaxing2009銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
液相
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| 問下大家 我在用液相測(cè)定樣品的時(shí)候 經(jīng)過條件摸索 最后確定了一個(gè)極性比較大的流動(dòng)相，但是用這個(gè)流動(dòng)相時(shí)我樣品中含的一些極性小的物質(zhì)不能出峰（樣品爬板的時(shí)候出了個(gè)雜點(diǎn)），我現(xiàn)在想看看樣品的的純度，用了一個(gè)極性小的流動(dòng)相，雜質(zhì)和產(chǎn)品都能出峰，就是產(chǎn)品的保留時(shí)間很小，請(qǐng)問用這種方法看純度可行嗎？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
jiangchunyong: 金幣+3, 謝謝 2012-11-29 18:29:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
jiangchunyong: 金幣+3, 謝謝 2012-11-29 18:29:02
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以我的經(jīng)驗(yàn)是不能的。如果想通過LC來確定： 1. 需要走一個(gè)全梯度的方法5%MeOH-100%MeOH 的梯度，如果HPLC需要60min分鐘比較合理，UPLC 8min比較合理 2. 最好有DAD檢測(cè)器，如果加一個(gè)MS那就更好了 3. 選擇適當(dāng)波長，如有雙鍵的化合物都會(huì)在220nm下有吸收，無雙鍵結(jié)構(gòu)如三萜和長鏈、脂肪酸等基本無紫外吸收，只能用210nm，如果你使用254nm檢測(cè)黃酮等類的物質(zhì)，沒有雙鍵的三萜類和脂肪酸類的雜質(zhì)根本檢測(cè)不出來。 所以說使用HPLC檢測(cè)純度需要很豐富的經(jīng)驗(yàn)。如果你有標(biāo)準(zhǔn)品只要操作誤差控制在合理范圍內(nèi)那就簡(jiǎn)單多了 |
2樓2012-11-29 16:16:18
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3樓2012-11-29 16:30:47
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