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大粗拉門(mén)牌新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助！PLGA微球要怎么制作！
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剛開(kāi)始接觸科研，初定的方向是做PLGA微球�？墒墙M里從來(lái)沒(méi)有做過(guò)，師兄師姐一句話讓我自己摸索。這幾天憑借不完整版步驟做了一次，很多問(wèn)題，特地注冊(cè)了賬號(hào)前來(lái)求助。如果各位大神有空的話希望幫忙解答一下，能留個(gè)聯(lián)系方式就更好！多謝！ 因?yàn)閯傞_(kāi)始試著做，也沒(méi)載藥，想先看看能不能做出來(lái)。用的是復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法。做出來(lái)總覺(jué)得怪怪的。附上不完整版步驟和疑惑。 1、1g PLGA溶于20ml二氯甲烷中，2ml 蒸餾水滴加入上述油相并用超生乳化儀乳化3min，得到初乳。 這步做起來(lái)倒沒(méi)什么問(wèn)題。用的是實(shí)驗(yàn)室超生碎菌的儀器，一開(kāi)始是隔水超生乳化的，好像沒(méi)有效果，就直接伸到里面了，做出來(lái)是乳濁液但是上面還漂著一塊液體師兄說(shuō)是水，有影響嗎？還有就是超生的功率有沒(méi)有影響？有沒(méi)有什么標(biāo)準(zhǔn)的值。 2、將初乳加到60ml 1%PVA水溶液中，不斷機(jī)械攪拌使二氯甲烷揮發(fā)完全。 PVA真心難溶啊。我也不懂，傻兮兮的拿手晃等它溶解，等了四個(gè)小時(shí)。。。后來(lái)查了一下說(shuō)是要先要放一天溶脹了再高溫?cái)嚢�，結(jié)果第二天終于溶解了。然后攪拌復(fù)乳，攪出來(lái)好多泡沫啊。。。攪了大概兩個(gè)小時(shí)，覺(jué)得差不多了。里面可以看見(jiàn)很多小顆粒，都是肉眼可見(jiàn)的。液體也是渾濁的。攪拌的時(shí)間和溫度有沒(méi)有說(shuō)法的？我就是都開(kāi)到最高攪拌的，都沒(méi)有控制轉(zhuǎn)速和溫度。 3、離心清洗三遍可得PLGA微球。 這個(gè)有點(diǎn)一頭霧水啊。把復(fù)乳倒到離心管里的時(shí)候那些大的顆粒都沒(méi)倒出來(lái)，總之感覺(jué)粒徑也不均一。離心5000轉(zhuǎn)，6Min，三次，離心管底下就是粉末狀的東西，但是不多，也不知道是否均一，也不知道怎么干燥。我就把離心管敞開(kāi)放著了。 以上就是我初次制作微球的過(guò)程和疑惑，剛開(kāi)始也不認(rèn)識(shí)什么人可以問(wèn)，認(rèn)識(shí)的人又都不會(huì)，特此求助！主要想知道步驟、試劑的量以及控制條件。因?yàn)橐茸约涸囍盐⑶蜃龀鰜?lái)才能進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)，所以有點(diǎn)著急。 再次表示感謝！！我的郵箱：J11945@126.com |
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4樓2012-12-08 20:54:15
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2樓2012-12-01 13:22:20
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karl2100: 金幣+1, 謝謝應(yīng)助！ 2012-12-08 00:00:02
大粗拉門(mén)牌: 金幣+1, ★★★★★最佳答案 2012-12-08 20:54:35
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嗯，我雖然不做PLGA球，但也算是在做微球，也有看師兄做過(guò)PLGA的微球，在此特說(shuō)一下一些情況。 首先，靠天靠地不如靠自己，你什么都不清楚就來(lái)問(wèn)，出問(wèn)題的地方會(huì)很多，很多人會(huì)不知怎么和你解釋滴哦。 PLGA微球是目前合成高分子微球里做得最多的一個(gè)，文獻(xiàn)絕對(duì)是有一大把的，你隨便一搜就是很多，相對(duì)于中文文獻(xiàn)，外文文獻(xiàn)制備信息會(huì)給的全面很多，你可以參考的也會(huì)多一些。推薦你按英文關(guān)鍵字搜索文獻(xiàn)比如，PLGA microsphere preparation。 其次，建議你在用一個(gè)試劑之前查清楚它的基本物化性質(zhì)再來(lái)開(kāi)始你的實(shí)驗(yàn)，百度一下，很快就知道了，不會(huì)花很多時(shí)間。但對(duì)你的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行以及一些防護(hù)很有幫助。 然后，你怎么能做試驗(yàn)不曉得你的基本參數(shù)咧？做微球，攪拌條件很重要的控制參數(shù)之一。你要是只是先做的試試，就不要攪拌太快，這樣不利于你的實(shí)驗(yàn)觀測(cè)和結(jié)果。我記得師兄PLGA微球攪拌速度都在300rpm以下，可以得到100~400um的微球，形態(tài)很好很圓整。攪拌速度越快，粒徑越小。注意機(jī)械攪拌槳的調(diào)控，就可以得到比較好的球粒徑分布，但不要期望是單分散的統(tǒng)一粒徑。 另外說(shuō)一下攪拌時(shí)間，都是要把二氯甲烷溶劑揮發(fā)掉，所以攪拌的時(shí)間會(huì)相對(duì)比較長(zhǎng)，我看師兄有時(shí)候就是攪拌過(guò)夜滴。 |
3樓2012-12-07 18:58:53
劉子軒
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5樓2012-12-18 12:59:15
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