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opt0708新蟲 (初入文壇)
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[求助]
Sau3A1酶切遇到了問題~求高手解答
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| 提取土壤基因組DNA，切膠純化后，做Sau3A1酶切，但是試了幾種酶切條件，都沒有切成，瓊脂糖檢測(cè)的時(shí)候，泳道是完全空白的，基因組DNA也沒有，有沒有做過的人指點(diǎn)一下啊~還有應(yīng)用的酶切體系和時(shí)間 |
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gyesang
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone: MolEPI+1, 神仙級(jí)別的人物 可否考慮做我們的專家 2012-12-07 14:36:13
opt0708: 金幣+25, ★★★★★最佳答案 2012-12-25 13:03:27
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1. 提取土壤基因組DNA，為什么要切膠純化？我覺得你提完基因組就OK了，不需要非把完整的帶切出來 2. 做Sau3A1酶切，但是試了幾種酶切條件，都沒有切成，瓊脂糖檢測(cè)的時(shí)候，泳道是完全空白的，基因組DNA也沒有 根據(jù)你的描述你的Sau3A1可能存在核酸酶污染把你的DNA降解了，所以跑膠后泳道完全空白，還有你先要確定你提到了基因組DNA，如果你酶切時(shí)，本來就沒有DNA，到時(shí)候電泳時(shí)泳道完全空白那也正常 附一張Sau3AI酶切后，DNA跑膠效果圖，應(yīng)該是整個(gè)膠都有DNA才對(duì) |
3樓2012-12-07 14:33:16
2樓2012-12-07 13:23:17
opt0708
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4樓2012-12-25 13:05:54
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