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測定藥物釋放曲線是否可以用在比色皿底部放置納米顆粒的方法？
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我想使用介孔硅納米顆粒載藥，由于樣品的量很少，1mL左右，感覺不太適合用透析的方法測釋放曲線，查了一下文獻，看到一篇08年的JACS是這么測定的： _______________________________________________________________ The dye-loaded, stoppered particles (15 mg) were placed in the corner of a cuvette before carefully adding HEPES buffer (50 mM, 12 mL, pH ) 7.5). To open the snap-tops, a solution of PLE [0.12 mL, 10 mg/mL in 3.2 M (NH4)2SO4] was carefully added while the solution was stirred. The emission of rhodamine B in the solution above the particles was measured as a function of time using a 514 nm probe beam (15 mW), both before and after addition of PLE. ———————————————————————————————————————— 簡言之，就是在比色皿底部角落放納米顆粒，然后加入緩沖液，加入另一試劑（某種酶）后，被包裹的染料羅丹明B開始釋放出來，體現(xiàn)在熒光強度的變化上。 這種方法的優(yōu)點時對試劑樣需要得少，但我的疑問是，納米顆粒是如何在角落被放置的？加入溶劑后納米顆粒不就被沖起來，分散在整個溶液體系中了嗎？測得的熒光數(shù)據(jù)不一定是被釋放出來的染料，也有可能是仍被包裹載體中的染料所發(fā)出的熒光吧？ 那么測定藥物釋放曲線是否可以用這種方法？如果可以，具體該如何操作？歡迎討論，謝謝 [ Last edited by oasis0709 on 2012-12-10 at 21:03 ] |
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2樓2012-12-11 12:13:23
qiang100
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3樓2012-12-12 10:06:17
4樓2012-12-12 10:13:21
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另外一篇advanced material也是這么做的 ——————————————————————————————————— Releasing experiments. Guest loaded Si-SS-CD was placed at the bottom of a quartz cuvette which was then filled with PBS. After addition of GSH or DTT, the fluorescence intensity of the solution of guest loaded Si-SS-CD was measured as a function of incubation time. ——————————————————————————————————— 難道dox在硅球內(nèi)和在硅球外的熒光還不一樣嗎？ |
5樓2012-12-12 10:15:36
lid2004
至尊木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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紅舟流星: 金幣+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 歡迎來到生物功能材料板塊應(yīng)助交流 2012-12-13 11:44:33
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原文我沒看，這個和你納米顆粒的大小，釋放速度等都有關(guān)系。如果文獻里面用的是微米級的顆粒，很容易沉淀在底部，而且藥物分子很小，容易釋放的話，有可能就是把比色皿直接放進去，靜止一段時間，顆粒沉淀在底部了，慢慢測就行了。 如果你用的介孔材料比較小，不容易沉淀的話，這個方法就不可靠，或者你是不是想辦法把一個半透膜固定在靠近底部的位置，隔離你的材料。另外你在藥物時間測定過程中，需要攪拌嗎？如果需要攪拌，就更不能直接測量。你可以取不同的時間點，稍微離心后，把粒子沉淀在底部，吸取上清液測量。然后把測量的液體倒回去。 第三個問題，你也可以測量后在你的原始溶液里面補充相同的體積的緩沖液，然后計算的時候把你每次取出釋放的藥物的量疊加就行了。這樣有另外一個好處。如果你藥物釋放的濃度比較大，每次補充新鮮的緩沖液后，相當(dāng)于稀釋了，更有利于介孔材料中藥物的釋放，這是動力平衡的問題。 |
6樓2012-12-13 10:14:03
hcswj
木蟲 (小有名氣)
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黃酮: 金幣+1, 謝謝回帖交流 2012-12-25 20:37:24
黃酮: 金幣+1, 謝謝回帖交流 2012-12-25 20:37:24
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你好，我也在做這個實驗。 我也在考慮樓主糾結(jié)的問題，如果一次次的轉(zhuǎn)移，離心，到最后材料必然會損失一部分，造成結(jié)果偏差，如果能在比色皿里做就不存在損失，過程還沒那么繁瑣。但是我想知道即使材料能夠沉淀在底部，直接測熒光會不會對上清液的熒光強度有所影響呢？光束不會照到底部嗎？ 另外你說的兩種方法，我覺得應(yīng)該從模擬細(xì)胞環(huán)境的角度出發(fā)，藥物是否會被細(xì)胞代謝掉？代謝速率如何？我不是學(xué)生物的我也不太懂，個人以為應(yīng)該會代謝掉一部分，可是這個該怎么模擬呢？ |
7樓2012-12-25 14:52:27
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