oasis0709

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[求助] 測定藥物釋放曲線是否可以用在比色皿底部放置納米顆粒的方法？

我想使用介孔硅納米顆粒載藥，由于樣品的量很少，1mL左右，感覺不太適合用透析的方法測釋放曲線，查了一下文獻，看到一篇08年的JACS是這么測定的：
_______________________________________________________________
The dye-loaded, stoppered particles (15 mg) were placed in the corner of a cuvette before carefully adding HEPES buffer (50 mM, 12 mL, pH ) 7.5). To open the snap-tops, a solution of PLE [0.12 mL, 10 mg/mL in 3.2 M (NH4)2SO4] was carefully added while the solution was stirred. The emission of rhodamine B in the solution above the particles was measured as a function of time using a 514 nm probe beam (15 mW), both before and after addition of PLE.
————————————————————————————————————————
簡言之，就是在比色皿底部角落放納米顆粒，然后加入緩沖液，加入另一試劑（某種酶）后，被包裹的染料羅丹明B開始釋放出來，體現(xiàn)在熒光強度的變化上。
這種方法的優(yōu)點時對試劑樣需要得少，但我的疑問是，納米顆粒是如何在角落被放置的？加入溶劑后納米顆粒不就被沖起來，分散在整個溶液體系中了嗎？測得的熒光數(shù)據(jù)不一定是被釋放出來的染料，也有可能是仍被包裹載體中的染料所發(fā)出的熒光吧？
那么測定藥物釋放曲線是否可以用這種方法？如果可以，具體該如何操作？歡迎討論，謝謝

[ Last edited by oasis0709 on 2012-12-10 at 21:03 ]

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1樓 2012-12-09 23:33:48

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hcswj

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黃酮: 金幣+1, 謝謝回帖交流 2012-12-25 20:37:24

引用回帖:

6樓: Originally posted by lid2004 at 2012-12-13 10:14:03
原文我沒看，這個和你納米顆粒的大小，釋放速度等都有關(guān)系。如果文獻里面用的是微米級的顆粒，很容易沉淀在底部，而且藥物分子很小，容易釋放的話，有可能就是把比色皿直接放進去，靜止一段時間，顆粒沉淀在底部了， ...

你好，我也在做這個實驗。
我也在考慮樓主糾結(jié)的問題，如果一次次的轉(zhuǎn)移，離心，到最后材料必然會損失一部分，造成結(jié)果偏差，如果能在比色皿里做就不存在損失，過程還沒那么繁瑣。但是我想知道即使材料能夠沉淀在底部，直接測熒光會不會對上清液的熒光強度有所影響呢？光束不會照到底部嗎？
另外你說的兩種方法，我覺得應(yīng)該從模擬細胞環(huán)境的角度出發(fā)，藥物是否會被細胞代謝掉？代謝速率如何？我不是學(xué)生物的我也不太懂，個人以為應(yīng)該會代謝掉一部分，可是這個該怎么模擬呢？

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啟程

7樓2012-12-25 14:52:27

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查看全部 7 個回答

oasis0709

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怎么沒人回復(fù)呢？自己頂一下

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2樓2012-12-11 12:13:23

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qiang100

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紅舟流星: 金幣+1, 歡迎新蟲來到生物功能材料板塊應(yīng)助交流 2012-12-12 12:15:10

我也遇到過這樣的問題，我是這樣想的，可不可以加入一點有機試劑把納米顆粒出來，在去離心去上清測濃度，或是直接離心可不可以測，看了那個英文的，他們做的是不是時間很短的，要不是不會在比色皿中直接做的。我是這么理解的，結(jié)合您自己的實驗再想想吧。

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想要與得到相差做到

3樓2012-12-12 10:06:17

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引用回帖:

3樓: Originally posted by qiang100 at 2012-12-12 10:06:17
我也遇到過這樣的問題，我是這樣想的，可不可以加入一點有機試劑把納米顆粒出來，在去離心去上清測濃度，或是直接離心可不可以測，看了那個英文的，他們做的是不是時間很短的，要不是不會在比色皿中直接做的。我是這 ...

謝謝回復(fù)。
原文的意思應(yīng)當(dāng)是在比色皿中原位測定的，若是每一個點都離心一下那就好辦了，可每測一個點就要"犧牲"一部分樣品，違背了我的初衷呀
原文測定的時間確實很短，從開始到釋放完，十幾分鐘吧

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4樓2012-12-12 10:13:21

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