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messi1910銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
qPCR總出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，到底是怎么回事？
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1. 我提取了兩個(gè)樣品的RNA，然后反轉(zhuǎn)錄為cDNA； 2. 通過普通的PCR檢測引物和cDNA情況，顯示特異性很好，單帶，如下圖： 3. 我在qPCR的時(shí)候擴(kuò)增曲線的重復(fù)性還是不錯(cuò)的，但是溶解曲線就不好了，總是有個(gè)小峰，就是所謂的非特異性擴(kuò)增吧，幾乎所有的靶標(biāo)都是這樣的，actin內(nèi)參也是的，但這個(gè)內(nèi)參，我原來用也可以啊，沒這種情況；難道這是模板的問題，但我的普通PCR擴(kuò)增的還挺好的��； 請(qǐng)大家?guī)臀曳治鱿率裁丛颍蛁PCR的設(shè)置我想沒太大的關(guān)系吧。 普通PCR 溶解曲線 讓我傷心的1 |
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luobugou
木蟲 (正式寫手)
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5樓2012-12-13 03:48:00
2樓2012-12-12 16:45:58
henryxue
木蟲 (小有名氣)
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3樓2012-12-12 21:06:34
4樓2012-12-13 00:27:56
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