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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 線粒體抽提純度檢測
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hellolin金蟲 (小有名氣)
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[求助]
線粒體抽提純度檢測
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| 現(xiàn)在正在抽提細胞的線粒體，抽提buffer：250mM蔗糖，5mM Tris-HCl，2mM EGTA，1%BSA。用玻璃勻漿器勻漿后1000g離心10min，取上清用10000g離心10min。然后用respiration medium洗兩次，沉淀用RIPA溶解后做western檢測胞質和線粒體的actin。理論上來說線粒體組分應該是沒有actin的，但是western現(xiàn)實線粒體組分還有殘留著很多actin，是否就說明抽提的線粒體有胞質污染，不夠純？如何改進比較好，能夠抽提到更純的線粒體？ |
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hellolin
金蟲 (小有名氣)
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2樓2013-03-21 20:32:59
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