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hellolin金蟲 (小有名氣)
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[求助]
線粒體抽提純度檢測(cè)
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| 現(xiàn)在正在抽提細(xì)胞的線粒體，抽提buffer：250mM蔗糖，5mM Tris-HCl，2mM EGTA，1%BSA。用玻璃勻漿器勻漿后1000g離心10min，取上清用10000g離心10min。然后用respiration medium洗兩次，沉淀用RIPA溶解后做western檢測(cè)胞質(zhì)和線粒體的actin。理論上來說線粒體組分應(yīng)該是沒有actin的，但是western現(xiàn)實(shí)線粒體組分還有殘留著很多actin，是否就說明抽提的線粒體有胞質(zhì)污染，不夠純？如何改進(jìn)比較好，能夠抽提到更純的線粒體？ |
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hellolin
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 金幣: 1304.2
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- 注冊(cè): 2011-09-13
- 專業(yè): 昆蟲學(xué)
2樓2013-03-21 20:32:59
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