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朱古力言小肥銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求指導(dǎo) 葉綠素含量測定 已有1人參與
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①取新鮮菠菜葉片，擦干凈組織表面的污染物，剪成碎塊，稱取 1 g，加 5 mL 純丙酮及少量石英砂和碳酸鈣于研缽中研磨，再加 80%丙酮洗滌過濾，定容至20 mL。 ②取提取液 1 mL 加 4 mL 80%丙酮， 用 80%丙酮為對照，直接用分光光度計(jì)測定 663 和 645 處的 OD 值，測量時數(shù)據(jù)可直接在分光光度計(jì)中讀取。 ③將上述 OD 值代入計(jì)算葉綠素濃度的公式中：Ca=12.7OD663-2.69OD645；Cb =22.9OD645-4.68OD663；Ct =Ca +Cb =8.02OD663+20.21OD645。 ④葉綠素含量（mg/g）=（葉綠素濃度×提取液總體積×稀釋倍數(shù)）/樣品鮮重 如上，這個提取液總體積指的是最后的總體積20mL嗎？稀釋倍數(shù)怎么算？求指導(dǎo) |
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2樓2012-12-18 22:46:36
【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
朱古力言小肥: 金幣+10, ★★★很有幫助 2012-12-20 08:50:30
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| 此處提取液總體積是指20mL，稀釋倍數(shù)為5倍，但樓主要注意你的公式有一點(diǎn)問題，應(yīng)該再除以1000，即葉綠素含量（mg/g）=（葉綠素濃度×提取液總體積×稀釋倍數(shù)）/（樣品鮮重x1000），這樣葉綠素含量的單位才是mg/g,因?yàn)檫@里Ct的單位是mg/L。這個問題有些書籍沒有說清楚，導(dǎo)致我一開始做的時候與相關(guān)文獻(xiàn)上的數(shù)據(jù)差距很大。還有樓主你的公式（Ca=12.7OD663-2.69OD645；Cb =22.9OD645-4.68OD663；Ct =Ca +Cb =8.02OD663+20.21OD645）不知從哪個資料查到的。與我查到的資料有點(diǎn)不同，就是系數(shù)上的微小區(qū)別，我先把我查到的公式說一下，你可以參考一下，希望對你有幫助：Ca=12.72OD663-2.59OD645；Cb =22.88OD645-4.67OD663；Ct =Ca +Cb =8.05OD663+20.29OD645。差別不是很大，但精確性應(yīng)該不一樣。 |
3樓2012-12-19 09:05:24
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4樓2012-12-19 09:47:47
葉落午夜香
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5樓2014-08-11 16:58:16
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6樓2014-08-17 10:41:30
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