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朱古力言小肥銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求指導(dǎo) 葉綠素含量測(cè)定 已有1人參與
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①取新鮮菠菜葉片,擦干凈組織表面的污染物,剪成碎塊,稱取 1 g,加 5 mL 純丙酮及少量石英砂和碳酸鈣于研缽中研磨,再加 80%丙酮洗滌過濾,定容至20 mL。 ②取提取液 1 mL 加 4 mL 80%丙酮, 用 80%丙酮為對(duì)照,直接用分光光度計(jì)測(cè)定 663 和 645 處的 OD 值,測(cè)量時(shí)數(shù)據(jù)可直接在分光光度計(jì)中讀取。 ③將上述 OD 值代入計(jì)算葉綠素濃度的公式中:Ca=12.7OD663-2.69OD645;Cb =22.9OD645-4.68OD663;Ct =Ca +Cb =8.02OD663+20.21OD645。 ④葉綠素含量(mg/g)=(葉綠素濃度×提取液總體積×稀釋倍數(shù))/樣品鮮重 如上,這個(gè)提取液總體積指的是最后的總體積20mL嗎?稀釋倍數(shù)怎么算?求指導(dǎo) |
實(shí)驗(yàn)方法 |

| 此處提取液總體積是指20mL,稀釋倍數(shù)為5倍,但樓主要注意你的公式有一點(diǎn)問題,應(yīng)該再除以1000,即葉綠素含量(mg/g)=(葉綠素濃度×提取液總體積×稀釋倍數(shù))/(樣品鮮重x1000),這樣葉綠素含量的單位才是mg/g,因?yàn)檫@里Ct的單位是mg/L。這個(gè)問題有些書籍沒有說清楚,導(dǎo)致我一開始做的時(shí)候與相關(guān)文獻(xiàn)上的數(shù)據(jù)差距很大。還有樓主你的公式(Ca=12.7OD663-2.69OD645;Cb =22.9OD645-4.68OD663;Ct =Ca +Cb =8.02OD663+20.21OD645)不知從哪個(gè)資料查到的。與我查到的資料有點(diǎn)不同,就是系數(shù)上的微小區(qū)別,我先把我查到的公式說一下,你可以參考一下,希望對(duì)你有幫助:Ca=12.72OD663-2.59OD645;Cb =22.88OD645-4.67OD663;Ct =Ca +Cb =8.05OD663+20.29OD645。差別不是很大,但精確性應(yīng)該不一樣。 |
金蟲 (小有名氣)

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