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chengx1121新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教下RT-PCR空白對(duì)照為啥總有反應(yīng)峰？
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最近補(bǔ)實(shí)驗(yàn)空白對(duì)照總有反應(yīng)峰，CT值跟正常樣本都差不多，25上下就起峰了 看了下溶解峰，漂亮的很，連引物二聚體的影子都沒有 我這是什么情況啊，該咋解決��？ 順便再問(wèn)下，各位讀取CT值的基線一般怎么選��？是默認(rèn)還是自己調(diào)整？ 這是我最近做的空白 這是溶解曲線 [ Last edited by chengx1121 on 2012-12-17 at 17:53 ] |
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txw87
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【答案】應(yīng)助回帖
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你這么多曲線，哪個(gè)是空白的呢？還是都是啊？ 你這個(gè)空白曾經(jīng)有過(guò)這種情況么？ 如果是第一次做就出現(xiàn)這種情況，可以說(shuō)引物設(shè)計(jì)得很差。 當(dāng)然還有一種可能，就是你的實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)有人使用過(guò)相同的引物進(jìn)行擴(kuò)增，然后他跑過(guò)電泳或開過(guò)管，導(dǎo)致你的實(shí)驗(yàn)室大環(huán)境被污染，而造成空白出現(xiàn)擴(kuò)增 |
7樓2012-12-18 17:22:36
cicelyzh
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2樓2012-12-18 07:39:02
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3樓2012-12-18 09:28:25
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問(wèn)題是這個(gè)曲線是空白對(duì)照啊……昨天做了幾個(gè)空白，擴(kuò)增曲線和溶解曲線還有更漂亮的，我不好意思帖出來(lái)……4樓2012-12-18 13:02:16
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