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Cllair

金蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 質(zhì)粒測(cè)序后發(fā)現(xiàn)有重疊現(xiàn)象

之前將克隆的基因直接送測(cè)序一直說(shuō)有重疊現(xiàn)象得不到測(cè)序結(jié)果。上次將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌提取質(zhì)粒送測(cè)序，結(jié)果還是有重疊現(xiàn)象。。。有點(diǎn)瀕臨崩潰的邊緣，十分想請(qǐng)教各位蟲(chóng)友，大家有沒(méi)有遇到過(guò)類似的情況，怎么解決的啊。
還有就是我想著直接送轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌去測(cè)序，之前查過(guò)資料說(shuō)菌樣測(cè)序的話結(jié)果可能不如質(zhì)粒好。。。能給點(diǎn)相關(guān)的建議不？

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有今生沒(méi)來(lái)世，且行且珍惜。

1樓 2012-12-18 19:57:58

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btx362237729

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invitrogen的測(cè)序還是不錯(cuò)的

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人生最黑暗的時(shí)光終于過(guò)去了

6樓2012-12-19 16:18:37

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cicelyzh

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如果質(zhì)粒沒(méi)有提好會(huì)影響測(cè)序結(jié)果。首先確定一定要挑單克隆。有時(shí)候兩個(gè)克隆靠在一起的不要用。篩到了陽(yáng)性克隆，可以直接送菌液測(cè)序。

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2樓2012-12-19 09:07:45

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fuding6

木蟲(chóng) (小有名氣)

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多換幾個(gè)公司測(cè)試試

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3樓2012-12-19 10:43:11

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Cllair

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引用回帖:

2樓: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-19 09:07:45
如果質(zhì)粒沒(méi)有提好會(huì)影響測(cè)序結(jié)果。首先確定一定要挑單克隆。有時(shí)候兩個(gè)克隆靠在一起的不要用。篩到了陽(yáng)性克隆，可以直接送菌液測(cè)序。

我這次把之前單克隆影印的菌落搖菌送測(cè)序的應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題吧？其實(shí)我一直都調(diào)單菌落的，這個(gè)基因自從在我?guī)熃闶掷锏臅r(shí)候就測(cè)序過(guò)很多次，一直因?yàn)橹丿B沒(méi)有得到序列，我都開(kāi)始懷疑這個(gè)基因本身有問(wèn)題了。。。

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4樓2012-12-19 11:11:58

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