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ztjren新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】測(cè)序出現(xiàn)重疊峰是怎么回事? 已有8人參與
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| 我是用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序的,電泳圖上條帶很清楚也沒(méi)有拖尾巴,會(huì)出現(xiàn)雜帶嗎?還有我的產(chǎn)物里是含染料的會(huì)有影響嗎? |

木蟲(chóng) (小有名氣)
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對(duì)你這個(gè)問(wèn)題而言產(chǎn)物雜合跟純不純化沒(méi)關(guān)系。如上樓所說(shuō),你如果是擴(kuò)增多倍體的某段基因序列,在某個(gè)堿基座位上本來(lái)就存在等位基因的差異或SNP,那你擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物雖然長(zhǎng)度相同,但其實(shí)是雜和產(chǎn)物,產(chǎn)物分子的堿基序列不是統(tǒng)一的,你用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序,在等位基因有差異或SNP位點(diǎn)上必然是套峰。這種情況你該克隆挑單菌落測(cè)序了。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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