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ztjren新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】測(cè)序出現(xiàn)重疊峰是怎么回事？ 已有8人參與
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| 我是用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序的，電泳圖上條帶很清楚也沒(méi)有拖尾巴，會(huì)出現(xiàn)雜帶嗎？還有我的產(chǎn)物里是含染料的會(huì)有影響嗎？ |
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5樓2010-08-25 10:05:27
周_yan
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2樓2010-08-25 09:47:14
ztjren
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3樓2010-08-25 09:58:48
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4樓2010-08-25 10:01:01
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6樓2010-08-25 10:12:50
won7
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7樓2010-08-25 10:47:49
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8樓2010-08-25 11:56:34
怎么都行
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+3):很好，很詳細(xì)~~ 2010-08-25 12:30:54
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對(duì)你這個(gè)問(wèn)題而言產(chǎn)物雜合跟純不純化沒(méi)關(guān)系。如上樓所說(shuō)，你如果是擴(kuò)增多倍體的某段基因序列，在某個(gè)堿基座位上本來(lái)就存在等位基因的差異或SNP，那你擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物雖然長(zhǎng)度相同，但其實(shí)是雜和產(chǎn)物，產(chǎn)物分子的堿基序列不是統(tǒng)一的，你用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序，在等位基因有差異或SNP位點(diǎn)上必然是套峰。這種情況你該克隆挑單菌落測(cè)序了。 |
9樓2010-08-25 12:12:24
ztjren
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10樓2010-08-25 12:42:00
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