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Lynn和Mia金蟲 (小有名氣)
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[求助]
揮大淚求助啊，細胞狀態(tài)越來越差還變少，什么原因啊（覺得不太像污染）
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同一天復蘇的U937細胞，狀態(tài)更差的都長好并凍存上了，狀態(tài)稍差一點點的兩瓶在即將凍存和傳代的時候，換了新一瓶血清后，細胞就開始增值的慢并且減少，加大FBS至20%培養(yǎng)，三天培養(yǎng)液也沒怎么變黃（以前都是變黃了表示細胞長得快該換液了），且晃動時肉眼看不到細胞了（之前可以看到），培養(yǎng)液澄清，未有菌絲、串珠、桿狀或蠕動小黑點。再次換以20%FBS的1640，四天了�。�！四天了�。�！培養(yǎng)液還是換時候的顏色，澄清，無菌絲、串珠、桿狀或蠕動小黑點，且鏡下細胞大幅減少。我都要崩潰了，本來都要準備加藥了，現(xiàn)在這個樣，我不知道是哪種污染？還是新血清不好？1640是從復蘇開始一直在用的同一瓶，血清是同一家代理公司買的hyclone南美胎牛血清。我覺得基本可以排除細菌真菌污染， 但不知支原體污染是幾天可以看出癥狀？這已經(jīng)7天了。到底是啥原因跪求各位高手指點�。�！感激不盡，多少金幣也奉上��！謝謝啊 |
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我查了一下午的細胞污染和圖片，但是我這個前前后后已經(jīng)7天了，支原體污染是不是該有啥癥狀出來了啊？可我還是澄清不變色，小黑點也很少，正常黑點數(shù)啊那種，也不是小黑點，有點還比較大，不是沙子樣，就像一直養(yǎng)的時候那種蛋白質(zhì)沉淀的東西。而且，很重要的一點是，四天前我換的液，四天后培養(yǎng)液顏色沒有變，然后我今天中午十二點還是換了液，用了自己的血清和別人的血清作對比，四個小時后，我去看細胞，發(fā)現(xiàn)變化很大，如圖，最上面小瓶是別人血清，中間第一個大瓶是我的血清，最底下大瓶是別人血清，我先換的大瓶的液，再換的小瓶的液，四個小時后，小瓶明顯變黃，大瓶基本還沒變 |
4樓2012-12-28 17:16:31
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這細胞是不會再要了的，但是要知道原因啊，不想半個多月的功夫就沒什么經(jīng)驗教訓地白白浪費了，所以還在查原因。細胞大部分是黑黑的，但是也有正常大小且透亮的極少數(shù)，過幾天再去看（期間不再換液，培養(yǎng)液顏色也沒有變黃）黑黑的細胞變少了，估計是死完了，原本透亮的極少數(shù)細胞增殖了，長出來好幾個新細胞團在一團，距離上次換培養(yǎng)液三天培養(yǎng)液里暫時還未看出啥蠕動或菌絲 10樓2013-01-06 14:30:38
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