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Lynn和Mia金蟲 (小有名氣)
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[求助]
揮大淚求助啊，細(xì)胞狀態(tài)越來越差還變少，什么原因啊（覺得不太像污染）
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同一天復(fù)蘇的U937細(xì)胞，狀態(tài)更差的都長好并凍存上了，狀態(tài)稍差一點(diǎn)點(diǎn)的兩瓶在即將凍存和傳代的時(shí)候，換了新一瓶血清后，細(xì)胞就開始增值的慢并且減少，加大FBS至20%培養(yǎng)，三天培養(yǎng)液也沒怎么變黃（以前都是變黃了表示細(xì)胞長得快該換液了），且晃動(dòng)時(shí)肉眼看不到細(xì)胞了（之前可以看到），培養(yǎng)液澄清，未有菌絲、串珠、桿狀或蠕動(dòng)小黑點(diǎn)。再次換以20%FBS的1640，四天了�。�！四天了�。�！培養(yǎng)液還是換時(shí)候的顏色，澄清，無菌絲、串珠、桿狀或蠕動(dòng)小黑點(diǎn)，且鏡下細(xì)胞大幅減少。我都要崩潰了，本來都要準(zhǔn)備加藥了，現(xiàn)在這個(gè)樣，我不知道是哪種污染？還是新血清不好？1640是從復(fù)蘇開始一直在用的同一瓶，血清是同一家代理公司買的hyclone南美胎牛血清。我覺得基本可以排除細(xì)菌真菌污染， 但不知支原體污染是幾天可以看出癥狀？這已經(jīng)7天了。到底是啥原因跪求各位高手指點(diǎn)！�。「屑げ槐M，多少金幣也奉上�。≈x謝啊 |
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2樓2012-12-28 16:40:42
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3樓2012-12-28 16:49:21
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我查了一下午的細(xì)胞污染和圖片，但是我這個(gè)前前后后已經(jīng)7天了，支原體污染是不是該有啥癥狀出來了��？可我還是澄清不變色，小黑點(diǎn)也很少，正常黑點(diǎn)數(shù)啊那種，也不是小黑點(diǎn)，有點(diǎn)還比較大，不是沙子樣，就像一直養(yǎng)的時(shí)候那種蛋白質(zhì)沉淀的東西。而且，很重要的一點(diǎn)是，四天前我換的液，四天后培養(yǎng)液顏色沒有變，然后我今天中午十二點(diǎn)還是換了液，用了自己的血清和別人的血清作對(duì)比，四個(gè)小時(shí)后，我去看細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)變化很大，如圖，最上面小瓶是別人血清，中間第一個(gè)大瓶是我的血清，最底下大瓶是別人血清，我先換的大瓶的液，再換的小瓶的液，四個(gè)小時(shí)后，小瓶明顯變黃，大瓶基本還沒變 |
4樓2012-12-28 17:16:31
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5樓2012-12-28 17:19:31
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6樓2012-12-28 17:21:15
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7樓2012-12-28 17:28:20
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8樓2012-12-31 11:38:10
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9樓2013-01-04 08:28:15
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謝謝回復(fù)  這細(xì)胞是不會(huì)再要了的，但是要知道原因啊，不想半個(gè)多月的功夫就沒什么經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)地白白浪費(fèi)了，所以還在查原因。細(xì)胞大部分是黑黑的，但是也有正常大小且透亮的極少數(shù)，過幾天再去看（期間不再換液，培養(yǎng)液顏色也沒有變黃）黑黑的細(xì)胞變少了，估計(jì)是死完了，原本透亮的極少數(shù)細(xì)胞增殖了，長出來好幾個(gè)新細(xì)胞團(tuán)在一團(tuán)，距離上次換培養(yǎng)液三天培養(yǎng)液里暫時(shí)還未看出啥蠕動(dòng)或菌絲 |
10樓2013-01-06 14:30:38
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