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wxy20052002木蟲 (著名寫手)
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愛與雨下: 金幣+3 2013-01-04 19:48:25
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材料與方法 1.植物材料 植物材料使用了大阪豐中市的三榮源ffi株式會社溫室栽培的梔子，把果實(shí)結(jié)果后一個(gè)月的5月27日到完全成熟的11月26日分成七個(gè)時(shí)期，在將近一個(gè)月的間隔下進(jìn)行果實(shí)采集。隨后依據(jù)收集順序貼上從S-1到S-7的樣品編號。果實(shí)在采摘后立即凍結(jié)，在進(jìn)行分析之前保存于冰箱。 2.色素成分的萃取 從各期采集樣品中隨機(jī)選出5個(gè)梔子果實(shí)，加入50%的丙酮后磨碎，使用100%的丙酮在暗處進(jìn)行浸漬萃取。該萃取工作在殘?jiān)泻}卜素呈現(xiàn)出的黃色消失前反復(fù)進(jìn)行。把這些萃取液合并一起，在減壓下讓使其濃縮干燥后再次溶解于丙酮，把其作為全色素溶液供之后的分析使用。不過，該溶液可就此供與著眼于C20-類胡蘿卜素的分析用；但是對c18-類胡蘿卜素進(jìn)行分析的時(shí)候，使用的是將該溶液與水以及醋酸乙醚勾兌獲得的醋酸乙醚萃取物。 3.總類胡蘿卜素含量的檢測 為了檢測各個(gè)樣品的總類胡蘿卜素含量，適當(dāng)稀釋了各個(gè)樣品的全色素溶液，用自記分光光度計(jì)檢測450nm的吸光度，根據(jù)西紅花酸的比吸光系數(shù)以西紅花酸換算值求取類胡蘿卜素含量。 4.為了調(diào)查伴隨著梔子果實(shí)發(fā)育類胡蘿卜素組分的變化，我們研究了基于c20-類胡蘿卜素HPLC的分析方法，確立了以下方法并在實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用。色譜柱使用nucleosil5C18，作為移動溶劑以及其時(shí)間程序，最初的15分鐘 |
2樓2013-01-04 17:03:40
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梔子的果實(shí)以及藏紅花的雌蕊含有的黃色素的主要成分是西紅花苷。P.Karrer等人的研究表明其結(jié)構(gòu)是碳數(shù)為20的類胡蘿卜素的西紅花酸上2分子的龍膽所酯鍵成的物質(zhì)。西紅花苷在自古以來被廣泛利用，結(jié)構(gòu)亦早已探明的情況下，其生物合成仍然極少受到研究。R.Kuhn等人由于從藏紅花中檢出了苦番紅花素以及臧紅花醛，因此假設(shè)有暫稱為原藏紅花素的C40苷類存在，把西紅花苷解釋為這個(gè)C40苷類的氧化分解物質(zhì)。另一方面，梅谷等人基于梔子果實(shí)的成分分析結(jié)果，指出西紅花苷可能是由未知的無色物質(zhì)從頭合成而成。目前關(guān)于西紅花苷的生物合成尚處于未解決的狀態(tài)。在此，本研究以獲取西紅花苷生物合成的相關(guān)知識為目的，對梔子果實(shí)從結(jié)果到完全成熟各個(gè)發(fā)育階段中類胡蘿卜素的含量及其其組分的變化進(jìn)行了經(jīng)時(shí)分析。 【答案】應(yīng)助回帖 材料與方法 1.植物材料 植物材料使用了大阪豐中市的三榮源ffi株式會社溫室栽培的梔子，把果實(shí)結(jié)果后一個(gè)月的5月27日到完全成熟的11月26日分成七個(gè)時(shí)期，在將近一個(gè)月的間隔下進(jìn)行果實(shí)采集。隨后依據(jù)收集順序貼上從S-1到S-7的樣品編號。果實(shí)在采摘后立即凍結(jié)，在進(jìn)行分析之前保存于冰箱。 2.色素成分的萃取 從各期采集樣品中隨機(jī)選出5個(gè)梔子果實(shí)，加入50%的丙酮后磨碎，使用100%的丙酮在暗處進(jìn)行浸漬萃取。該萃取工作在殘?jiān)泻}卜素呈現(xiàn)出的黃色消失前反復(fù)進(jìn)行。把這些萃取液合并一起，在減壓下讓使其濃縮干燥后再次溶解于丙酮，把其作為全色素溶液供之后的分析使用。不過，該溶液可就此供與著眼于C20-類胡蘿卜素的分析用；但是對c18-類胡蘿卜素進(jìn)行分析的時(shí)候，使用的是將該溶液與水以及醋酸乙醚勾兌獲得的醋酸乙醚萃取物。 3.總類胡蘿卜素含量的檢測 為了檢測各個(gè)樣品的總類胡蘿卜素含量，適當(dāng)稀釋了各個(gè)樣品的全色素溶液，用自記分光光度計(jì)檢測450nm的吸光度，根據(jù)西紅花酸的比吸光系數(shù)以西紅花酸換算值求取類胡蘿卜素含量。 4.為了調(diào)查伴隨著梔子果實(shí)發(fā)育類胡蘿卜素組分的變化，我們研究了基于c20-類胡蘿卜素HPLC的分析方法，確立了以下方法并在實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用。色譜柱使用nucleosil5C18，作為移動溶劑以及其時(shí)間程序，最初的15分鐘 |
4樓2013-01-04 17:05:07
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梔子的果實(shí)以及藏紅花的雌蕊含有的黃色素的主要成分是西紅花苷。P.Karrer等人的研究表明其結(jié)構(gòu)是碳數(shù)為20的類胡蘿卜素的西紅花酸上2分子的龍膽所酯鍵成的物質(zhì)。西紅花苷在自古以來被廣泛利用，結(jié)構(gòu)亦早已探明的情況下，其生物合成仍然極少受到研究。R.Kuhn等人由于從藏紅花中檢出了苦番紅花素以及臧紅花醛，因此假設(shè)有暫稱為原藏紅花素的C40苷類存在，把西紅花苷解釋為這個(gè)C40苷類的氧化分解物質(zhì)。另一方面，梅谷等人基于梔子果實(shí)的成分分析結(jié)果，指出西紅花苷可能是由未知的無色物質(zhì)從頭合成而成。目前關(guān)于西紅花苷的生物合成尚處于未解決的狀態(tài)。在此，本研究以獲取西紅花苷生物合成的相關(guān)知識為目的，對梔子果實(shí)從結(jié)果到完全成熟各個(gè)發(fā)育階段中類胡蘿卜素的含量及其其組分的變化進(jìn)行了經(jīng)時(shí)分析。 材料與方法 1.植物材料 植物材料使用了大阪豐中市的三榮源ffi株式會社溫室栽培的梔子，把果實(shí)結(jié)果后一個(gè)月的5月27日到完全成熟的11月26日分成七個(gè)時(shí)期，在將近一個(gè)月的間隔下進(jìn)行果實(shí)采集。隨后依據(jù)收集順序貼上從S-1到S-7的樣品編號。果實(shí)在采摘后立即凍結(jié)，在進(jìn)行分析之前保存于冰箱。 2.色素成分的萃取 從各期采集樣品中隨機(jī)選出5個(gè)梔子果實(shí)，加入50%的丙酮后磨碎，使用100%的丙酮在暗處進(jìn)行浸漬萃取。該萃取工作在殘?jiān)泻}卜素呈現(xiàn)出的黃色消失前反復(fù)進(jìn)行。把這些萃取液合并一起，在減壓下讓使其濃縮干燥后再次溶解于丙酮，把其作為全色素溶液供之后的分析使用。不過，此溶液可就此提供與著眼于C20-類胡蘿卜素的分析，但是對c18-類胡蘿卜素進(jìn)行分析的時(shí)候使用的是，該溶液用水及醋酸乙酯分配獲得的醋酸乙酯萃取物。 3.總類胡蘿卜素含量的檢測 為了檢測各個(gè)樣品的總類胡蘿卜素含量，適當(dāng)稀釋了各個(gè)樣品的全色素溶液，用自記分光光度計(jì)檢測450nm的吸光度，根據(jù)西紅花酸的比吸光系數(shù)以西紅花酸換算值求取類胡蘿卜素含量。 4.類胡蘿卜素成分分析 為了調(diào)查伴隨著梔子果實(shí)發(fā)育類胡蘿卜素組分的變化，我們研究了基于c20-類胡蘿卜素HPLC的分析方法，確立了以下方法并在實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用。色譜柱使用nucleosil5C18，作為移動溶劑以及其時(shí)間程序，最初的15分鐘我們采用50%甲醇，15分鐘后到35分鐘之間采用50%甲醇至100%甲醇的連續(xù)梯度，35分鐘后以100%甲醇為使用條件，在440nm波長下監(jiān)測。設(shè)備使用的是日本分光制造的HPLC(880序列)，數(shù)據(jù)使用色譜包（ShimadzuC-R4A）處理。 5.類胡蘿卜素的定性分析 類胡蘿卜素的定性分析通過色譜法進(jìn)行。吸附層采用硅膠，展開劑使用了10：3：1的乙酸乙酯，甲醇，水。 6.堿性水解 我們對西紅花苷等的類胡蘿卜素酸的蔗糖酯的水解（皂化）采用了以下方式。把樣品溶解于1%的氫氧化鉀水溶液中，在暗處室溫下放置一個(gè)晚上后用稀硫酸調(diào)整PH到2，用水和醋酸乙醚分配，以醋酸乙酯溶液的形式獲得了類胡蘿卜素酸。 7.干燥重量的測定 在稱過實(shí)的新鮮重量后，切成厚約1cm的切片。恒溫干燥機(jī)中100℃干燥2小時(shí)后，放入干燥器冷卻測定干燥重量。 8.西紅花苷與西紅花酸 我們接受了來自三榮源株式會社的西紅花苷標(biāo)準(zhǔn)樣品，用堿性水解西紅花酸制備了西紅花酸的標(biāo)準(zhǔn)樣品。 |
5樓2013-01-05 14:52:14
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