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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » RT-PCR高手請進
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hwchen2000金蟲 (正式寫手)
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[求助]
RT-PCR高手請進
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請高手們幫我看看RT-PCR的電泳圖，給點建議 圖2中箭頭所指是曾經(jīng)得到的產(chǎn)物，但是之后再也沒有重復到，圖1是PCR和第二輪PCR結(jié)果 圖片1.jpg 圖片2.jpg [ Last edited by hwchen2000 on 2013-1-2 at 11:05 ] |
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zhang881007
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3樓2013-01-04 16:59:11
zhaodahe
木蟲 (正式寫手)
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2樓2013-01-02 17:27:39
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
| 樓主的RT-PCR沒有做出來，首先要確定產(chǎn)物的大小，和標準條帶對比看看是否擴增出來了，從兩個圖看，根本沒有擴增出來。如果已經(jīng)重復很多次了都是這樣的話，建議重新開始：方法一、提取mRNA時先跑個瓊脂糖快速電泳看看是否出現(xiàn)2或3個條帶，出現(xiàn)的話說明mRNA這一步?jīng)]有問題；方法二、換成隨機引物做PCR擴增，如果出現(xiàn)明顯條帶就說明樓主的引物設計有問題，如果不出現(xiàn)條帶說明可能是mRNA降解了壓根就沒有成功合成過cDNA。 |
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hwchen20004樓2013-01-04 17:53:46
hwchen2000
金蟲 (正式寫手)
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5樓2013-01-07 20:52:12
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