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如何確定不同藻液吸收值的測定波長，比如螺旋藻文獻報道在560nm處測定OD？
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請教，微藻培養(yǎng)過程中，一般采用測定OD值來換算生物量，那么如何確定某種微藻的測定波長呢？ 去文獻中找比較常用的方法，但是我養(yǎng)的幾種微藻沒有找到相關(guān)文獻，所以打算用波譜掃描后選取最大吸收峰的波長，我之前曾對幾個樣品掃描，但是很迷惑的是： 測定的螺旋藻在680nm處有吸收峰，在500nm到350nm是升高的趨勢，那怎么文獻中選擇560nm為測定波長呢，選擇依據(jù)是？ 求解！先行謝過！ |
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| 用吸光度換算生物量本身就不是很科學(xué)的辦法。但是這個指標很容易測，所以大家都用。但只是一個大致的衡量。680的吸收峰是葉綠素a的紅區(qū)吸收。350-500nm包括很多吸收，主要有葉綠素的藍區(qū)吸收，還有各類胡蘿卜素的吸收。用560nm做吸收主要是幾種藻膽蛋白色素的吸收。因為藻膽體是藍藻的主要天線蛋白，其色素的含量往往可以衡量藍藻的生長狀況。但是，在不同的光照、營養(yǎng)條件下，藻膽色素的含量是有差別的，所以不能完全用太來衡量生物量。 |
bianyu2樓2013-01-06 14:07:34
3樓2013-01-06 15:56:23
cicelyzh
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呵呵，2樓也是做藻的啊~ 一般而言，通過OD來評估細胞數(shù)，如果沒有同行公認的標準，則自己要做一些基礎(chǔ)工作：將菌液梯度稀釋，然后每個稀釋度做全波長掃描；根據(jù)掃描的結(jié)果，對應(yīng)于稀釋度（最好有平板計數(shù)），看看你打算選擇的OD值和細胞數(shù)是否對應(yīng)； 有的時候，細胞特征吸收峰往往和其生理狀態(tài)有關(guān)，如藍細菌的435,515，630,680等，這樣的位置最好不要選，他們難以用于評價細胞量。 當(dāng)然，選擇如750，可能能夠評價細胞量，但是難以區(qū)分活細胞或者死細胞，看你的工作需要。 |
6樓2013-01-10 22:58:26
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