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關(guān)于ChIP染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的疑惑
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最近在研究DNA和蛋白質(zhì)相互作用的ChIP技術(shù)，實驗室內(nèi)和周圍實驗室都沒有人做過，有個問題：我看文章上基本上的實驗步驟是用甲醛完成DNA和protein在動植物體內(nèi)的交聯(lián)，之后提取染色質(zhì)，在超聲破碎后用所要研究的蛋白質(zhì)的特異性抗體做免疫沉淀，DNA-protein復(fù)合物提取出來之后再解交聯(lián)，然后DNA拿去測序或者microarray. 看文獻(xiàn)中的方法都是做的體內(nèi)實驗，有沒有可能我直接提取植物DNA，然后加上我的自己在E,coli中表達(dá)純化的重組蛋白體外交聯(lián)，然后利用我重組蛋白上的His-tag的抗體直接免疫沉淀DNA和蛋白復(fù)合物，或者用NI柱純化呢？？？ |
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cicelyzh
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