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晶晶蟲(chóng)金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于ChIP染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的疑惑
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最近在研究DNA和蛋白質(zhì)相互作用的ChIP技術(shù)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和周?chē)鷮?shí)驗(yàn)室都沒(méi)有人做過(guò)，有個(gè)問(wèn)題：我看文章上基本上的實(shí)驗(yàn)步驟是用甲醛完成DNA和protein在動(dòng)植物體內(nèi)的交聯(lián)，之后提取染色質(zhì)，在超聲破碎后用所要研究的蛋白質(zhì)的特異性抗體做免疫沉淀，DNA-protein復(fù)合物提取出來(lái)之后再解交聯(lián)，然后DNA拿去測(cè)序或者microarray. 看文獻(xiàn)中的方法都是做的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，有沒(méi)有可能我直接提取植物DNA，然后加上我的自己在E,coli中表達(dá)純化的重組蛋白體外交聯(lián)，然后利用我重組蛋白上的His-tag的抗體直接免疫沉淀DNA和蛋白復(fù)合物，或者用NI柱純化呢？？？ |
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cicelyzh
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2樓2013-01-10 07:10:40
zhang881007
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3樓2013-01-10 10:48:35
晶晶蟲(chóng)
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4樓2013-01-10 16:55:35
cicelyzh
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6樓2013-03-22 21:42:45
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