Movchan

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[交流] HPLC法分析中藥提取物，梯度洗脫是造成較多雜質(zhì)峰的主因嗎？

中藥提取物成分相對(duì)復(fù)雜，極性差異大，一般做HPLC法時(shí)常采用梯度模式，可縮短分析時(shí)間、提高效率。但有時(shí)，梯度也會(huì)引起雜質(zhì)峰較多，甚至與主峰重疊；加之梯度常引起嚴(yán)重的基線漂移而導(dǎo)致重現(xiàn)性下降，所以一般地能用等度就盡量采用等度分析。
最近投稿我寫到“當(dāng)采用梯度洗脫時(shí)，雜質(zhì)峰較多且出現(xiàn)明顯的基線漂移，影響峰面積的準(zhǔn)確積分，。。�！保Y(jié)果審稿人認(rèn)為，“這段話建議作者修改。可能不會(huì)因?yàn)椴捎锰荻认疵�，造成雜質(zhì)峰較多”。
請(qǐng)問(wèn)蟲(chóng)友怎么看待此問(wèn)題，歡迎大家討論，并感謝您的寶貴意見(jiàn)！

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1樓 2013-01-11 10:00:30

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fxzxp

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xiaoxiao270: 金幣+1 2013-01-13 12:19:06

同意審稿人的觀點(diǎn)。
雖然梯度洗脫會(huì)產(chǎn)生基線的漂移，但不會(huì)產(chǎn)生雜質(zhì)峰。對(duì)于基線漂移可以用空白對(duì)照，在不影響檢測(cè)的情況下是可以接受的。如果系統(tǒng)污染，往往會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的雜質(zhì)峰。這樣的系統(tǒng)得出的數(shù)據(jù)是不能接受的。

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3樓2013-01-11 10:41:26

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Cpuli87

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xiaoxiao270: 金幣+1 2013-01-13 12:19:09

編輯說(shuō)的有道理呢，假如說(shuō)是因?yàn)樘荻认疵撛斐呻s質(zhì)峰多的話，你大可以走一針空白就知道了呢，所以還是得以實(shí)驗(yàn)說(shuō)話的。

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4樓2013-01-11 10:44:49

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Movchan

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雜質(zhì)峰在等度下看不到而在梯度下出現(xiàn)，說(shuō)明等度時(shí)成分沒(méi)有完全出來(lái)還是雜質(zhì)峰來(lái)自柱頭，空白針即可驗(yàn)證，贊同樓上的意見(jiàn)。

[ Last edited by Movchan on 2013-1-11 at 11:02 ]

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5樓2013-01-11 10:49:13

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1）梯度洗脫的目的就是要讓盡可能多的雜質(zhì)峰與主峰保持較好的分離度；
2）基線漂移可用空白對(duì)照加以扣除，也可用乙腈/水作為洗脫體系，基線很好。

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14樓2013-01-11 11:58:21

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weiwei_l

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15樓2013-01-11 12:14:40

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我在流動(dòng)相改變時(shí)比例時(shí)會(huì)出一個(gè)峰，這個(gè)應(yīng)該是流動(dòng)相改變的一個(gè)峰，不屬于雜質(zhì)。因?yàn)槟呐挛以跊_干凈的柱子的時(shí)候也會(huì)出現(xiàn)這個(gè)峰。梯度洗脫應(yīng)該是說(shuō)，在我要的峰的時(shí)候降低甲醇比例，讓峰更分離，在我不需要的地方加大甲醇比例，縮短時(shí)間。所以不應(yīng)該造成雜質(zhì)峰增多。

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16樓2013-01-12 21:19:45

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選擇甲醇/水作為流動(dòng)相，在250nm檢測(cè)波長(zhǎng)下，梯度模式會(huì)不會(huì)造成較明顯的基線漂移呢？

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17樓2013-01-12 23:09:18

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等度洗脫只是有些成分不能洗脫出來(lái)，梯度洗脫效果能分離的成分越多，梯度變化大時(shí)，可能其他成分會(huì)與主峰重疊。

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18樓2013-01-14 21:33:26

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選擇甲醇/水作為流動(dòng)相，在250nm檢測(cè)波長(zhǎng)下，梯度模式會(huì)造成較明顯的基線漂移,乙腈/水作為流動(dòng)相會(huì)穩(wěn)定一些，而且梯度洗脫對(duì)水的質(zhì)量要求比較高，水的質(zhì)量不好，梯度的時(shí)候哪怕是空白都會(huì)出現(xiàn)很多雜質(zhì)峰！

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19樓2013-04-28 10:28:36

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我也做過(guò)中藥提取物梯度啊，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有雜質(zhì)峰，也沒(méi)有嚴(yán)重的基線漂移

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20樓2013-04-28 11:28:31

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