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bradyluo新蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于菌種保存
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最近篩出一批菌體，要放假了想要保存！ 但是用的甘油滅菌后用槍吸不上來，特別綢，而且之前用甘油保存過得菌體再放到培養(yǎng)基里面活化的時(shí)候，活化不出來，是不是有什么問題啊? 求各位大神指教��！ |
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2樓2013-01-14 14:16:46
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【答案】應(yīng)助回帖
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bradyluo: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-01-14 16:09:15
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由于純甘油十分粘稠，很難定量，一般配成終濃度 50% 的水溶液，高壓滅菌后室溫保存即可。使用時(shí)按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均勻，然后迅速冷凍（可以用液氮）。 保存后活化不出菌種，可能是甘油濃度不夠，造成菌種死亡，常用的是終濃度 10-30% 的甘油，多數(shù)用20%左右。 |
3樓2013-01-14 15:24:39
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhang8826857: 金幣+5, 鼓勵(lì)新蟲 2013-01-19 21:27:04
| 我比較喜歡用高壓滅菌的純甘油，這樣保存菌種的時(shí)候可以根據(jù)不同的需要隨時(shí)加入到LB或者其它液體培養(yǎng)基中配成保存液。因?yàn)榧兏视陀盟{(lán)槍頭很難吸，所以可以把藍(lán)槍頭事先用剪刀剪去一小段尖頭再滅菌備用就可以啦~~保存菌種通常用20%甘油。注意加入甘油后要混勻，根據(jù)菌種不同，可以選擇直接放入-80或者先用液氮速凍再放入-80. |
7樓2013-01-15 09:03:48
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