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alice鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
哪位熟悉枯草桿菌表達系統前輩，來幫忙解決一下小妹的實驗��！做不完怎么過年�。。�！
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本人做一個大黃歐文菌來源的蔗糖異構酶的表達，這基因已經在大腸桿菌里表達過了，想在枯草桿菌里表達，用的PHY300的穿梭質粒做載體，加了P43的啟動子，構建時P43和目的基因之間加入一個酶切位點，現在轉化完成，質粒雙酶切驗證正確。但37度下表達兩天后仍測不到酶活，哪位前輩以前做過的，可不可以給指導下我的問題是出在哪了？是本身異源表達有問題，還是載體的問題，還是表達條件的問題？？？馬上要放假了，研究生最后一年，不想過年回來還糾結這些實驗啊 ……………… |
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