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hengyue5257木蟲 (著名寫手)
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[求助]
如何用Real-time 檢測投加反應(yīng)器后的純菌
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| 我們已經(jīng)獲得一株純菌，想投加到原反應(yīng)器中看這株菌能否提高反應(yīng)器的處理能力。想通過Real-time PCR來檢測這株菌在反應(yīng)器的變化。怎么來做，比如如何設(shè)計引物，采用什么標記；采用相對定量還是絕對定量。之前沒有做過，所以問題較多，請大家?guī)椭? |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hengyue5257: 金幣+20 2013-01-18 20:47:32
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hengyue5257: 金幣+20 2013-01-18 20:47:32
| real time pcr是對某一基因的表達高低來分析的，是基因水平的研究，聽樓主說想要檢測菌株在反應(yīng)器的變化，個人覺得應(yīng)該首先選取幾個與菌株生理變化相關(guān)的基因來研究，比如微生物衰亡相關(guān)的，細胞分裂相關(guān)的等等，然后設(shè)計每一個基因的引物（prime5.0設(shè)計），優(yōu)化基因的擴增體系，最后可以用SYBR GREEN法或者探針法進行rt PCR，數(shù)據(jù)分析建議還是相對定量法好一些，常用2-ΔΔct法。 |
2樓2013-01-18 14:29:16
hengyue5257
木蟲 (著名寫手)
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3樓2013-01-18 20:47:27
oldflying
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4樓2013-01-19 18:09:51
hengyue5257
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5樓2013-01-19 21:31:38
oldflying
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6樓2013-01-19 22:24:54
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