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[求助]
蛋白定位
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質(zhì)粒myc 與蛋白A 融合,轉(zhuǎn)染MCF7 細(xì)胞,48小時(shí)后固定細(xì)胞,做immunoflurescence。轉(zhuǎn)染方法,Neon 電轉(zhuǎn)染。 很久以前這個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)了很多遍,都是一個(gè)結(jié)果,這個(gè)蛋白定位在細(xì)胞核。前幾天重復(fù)了一下這個(gè)實(shí)驗(yàn),很郁悶的發(fā)現(xiàn)此蛋白又遍布全細(xì)胞了,為什么。课覜]有做任何改動(dòng),僅僅是重復(fù)一下以前的實(shí)驗(yàn),結(jié)果卻不一樣。不但這個(gè)蛋白,我另外一個(gè)蛋白也出現(xiàn)了一樣的結(jié)果,從以前定位到細(xì)胞核到這次遍布全細(xì)胞。 有一點(diǎn)不一樣的是我們用于轉(zhuǎn)染的移液槍壞過,然后修過,我嚴(yán)重懷疑移液槍有問題。我的感覺是如果細(xì)胞核膜被破壞了,細(xì)胞核內(nèi)的物質(zhì)就會(huì)外泄。求助達(dá)人們解釋解釋。Last minite,馬上開committee meeting了,這是我目前最重要的結(jié)果,急求解答。 |
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