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[求助]
蛋白定位
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質(zhì)粒myc 與蛋白A 融合，轉(zhuǎn)染MCF7 細(xì)胞，48小時后固定細(xì)胞，做immunoflurescence。轉(zhuǎn)染方法，Neon 電轉(zhuǎn)染。 很久以前這個實驗重復(fù)了很多遍，都是一個結(jié)果，這個蛋白定位在細(xì)胞核。前幾天重復(fù)了一下這個實驗，很郁悶的發(fā)現(xiàn)此蛋白又遍布全細(xì)胞了，為什么��？我沒有做任何改動，僅僅是重復(fù)一下以前的實驗，結(jié)果卻不一樣。不但這個蛋白，我另外一個蛋白也出現(xiàn)了一樣的結(jié)果，從以前定位到細(xì)胞核到這次遍布全細(xì)胞。 有一點不一樣的是我們用于轉(zhuǎn)染的移液槍壞過，然后修過，我嚴(yán)重懷疑移液槍有問題。我的感覺是如果細(xì)胞核膜被破壞了，細(xì)胞核內(nèi)的物質(zhì)就會外泄。求助達(dá)人們解釋解釋。Last minite，馬上開committee meeting了，這是我目前最重要的結(jié)果，急求解答。 |
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