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農(nóng)田耕者金蟲(chóng) (小有名氣)
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DNA甲基化實(shí)驗(yàn)中的疑惑 已有1人參與
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最近一直在做種子的甲基化，從種子胚中提取的DNA，質(zhì)量和濃度都還不錯(cuò)，260/280和260/230均在1.9-2.0之間，濃度2000μg/L，酶切用的是ECORI和HPAII（快酶），連接、預(yù)擴(kuò)、選擴(kuò)，效果一直不是很滿意，聚丙烯酰胺凝膠電泳的效果不是很好，時(shí)而可以跑出條帶，時(shí)而彌散一片。 有幾個(gè)問(wèn)題：1、酶切后用不用純化，如果不純化，連接接頭的時(shí)候容易嗎？連接后如何檢測(cè)是否連接上了？2、有沒(méi)有做過(guò)DNA甲基化分析的高手（MSAP），求各個(gè)步驟的體系？3、在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，最經(jīng)常出現(xiàn)的問(wèn)題是什么？ 先謝謝各位高手了 |
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