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農(nóng)田耕者金蟲 (小有名氣)
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[求助]
DNA甲基化實(shí)驗(yàn)中的疑惑 已有1人參與
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最近一直在做種子的甲基化，從種子胚中提取的DNA，質(zhì)量和濃度都還不錯，260/280和260/230均在1.9-2.0之間，濃度2000μg/L，酶切用的是ECORI和HPAII（快酶），連接、預(yù)擴(kuò)、選擴(kuò)，效果一直不是很滿意，聚丙烯酰胺凝膠電泳的效果不是很好，時而可以跑出條帶，時而彌散一片。 有幾個問題：1、酶切后用不用純化，如果不純化，連接接頭的時候容易嗎？連接后如何檢測是否連接上了？2、有沒有做過DNA甲基化分析的高手（MSAP），求各個步驟的體系？3、在這個實(shí)驗(yàn)過程中，最經(jīng)常出現(xiàn)的問題是什么？ 先謝謝各位高手了 |
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9樓2014-03-04 16:29:00
lnsbsmillet
銅蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
2樓2013-02-01 21:40:40
3樓2013-02-27 13:06:14
ADTechnology 
捐助貴賓 (著名寫手)
表觀遺傳學(xué)專業(yè)供應(yīng)商
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- 專業(yè): 人類遺傳學(xué)
4樓2013-04-17 21:01:17
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