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lanse2010

新蟲(chóng) (小有名氣)

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[交流] 植物體內(nèi)脯氨酸和丙二醛MDA含量的測(cè)定方法

大家有木有實(shí)際做過(guò)植物體內(nèi)脯氨酸和丙二醛含量測(cè)定的。植物的鮮樣取多少合適呢？因?yàn)橐呀?jīng)做過(guò)植物體內(nèi)SOD、POD、CAT活性的測(cè)定，植物的鮮樣不多了，所以這兩個(gè)指標(biāo)測(cè)定時(shí)想少取樣。請(qǐng)大家貢獻(xiàn)下自己的具體操的實(shí)驗(yàn)步驟唄，謝謝大家啦。還有就是我做得是煤礦區(qū)植物施肥方式是否對(duì)植物生長(zhǎng)有影響的實(shí)驗(yàn)，這兩個(gè)指標(biāo)能說(shuō)明問(wèn)題嗎？

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1樓 2013-01-21 09:48:45

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starseacow

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amisking: 金幣+4, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流問(wèn)題。 2013-01-21 20:27:31

丙二醛測(cè)定：
MDA通過(guò)硫代巴比妥酸法測(cè)定。取0.500 g樣品，加5%三氯乙酸5 ml，研磨后所得勻漿在3000 r/min下離心10 min，根據(jù)5.4.5.2項(xiàng)下方法測(cè)定上清液中蛋白質(zhì)含量。取上清液2 ml，加0.67%硫代巴比妥酸2 ml，混勻后在100℃水浴30 min，冷卻后3000 r/min離心10 min。取上清液測(cè)定在450 nm、532 nm和600 nm處吸光度值，按如下公式計(jì)算MDA濃度。
丙二醛含量（umol/mg蛋白）=[6.45*(A532-A600)-0.56*A450*V*a]/w
公式中，A532、A600、A450分別代表532 nm、600 nm、450 nm波長(zhǎng)下吸光度值；v（ml）為反應(yīng)總體積；a為樣品最終測(cè)定時(shí)稀釋倍數(shù)；w（mg/ml）為勻漿上清液中蛋白質(zhì)含量。

方法來(lái)源：王學(xué)奎. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)（第2版）[M]，高等教育出版社，2006：280-281

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4樓2013-01-21 17:26:39

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假大空

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2樓2013-01-21 10:20:57

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userhung

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xy656691: 金幣+10, 應(yīng)助指數(shù)+1, 很有用 2013-01-21 11:47:28

http://www.doc88.com/p-215659570612.html
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4723587
http://zhidao.baidu.com/question/79948605.html

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3樓2013-01-21 10:50:00

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starseacow

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amisking: 回帖置頂 2013-01-21 20:27:37

植物組織在逆境下遭受氧化脅迫時(shí)，常常會(huì)發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，MDA是其產(chǎn)物之一。MDA含量的高低反映了植物細(xì)胞膜過(guò)氧化作用的強(qiáng)弱與質(zhì)膜的破壞程度。而脯氨酸積累，也是植物對(duì)抗活性氧迸發(fā)的手段。你要做的是對(duì)植物生長(zhǎng)的影響，我感覺(jué)單憑這兩個(gè)指標(biāo)說(shuō)明不了太大問(wèn)題，不同施肥方式會(huì)影響抗植物抵抗脅迫能力么？如果你就這個(gè)問(wèn)題入手做實(shí)驗(yàn)，你現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)體系恰當(dāng)么？

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lanse2010

5樓2013-01-21 17:31:49

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