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porphybaby金蟲 (正式寫手)
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[求助]
為什么我的DNA 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 跑成這個鬼樣？
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如圖所示。 最左邊是 一個突變的單鏈DNA序列 是呈單鏈結(jié)構(gòu)的 含27個堿基 第二個是 經(jīng)過退火的一個四鏈體DNA序列 呈G-四鏈體結(jié)構(gòu) 也含27個堿基 再往右邊走 它們都是加了我的藥物處理的DNA 可是會發(fā)現(xiàn) 根本就沒有條帶 跑都跑不出來？？這是怎么回事？ 所用的藥物濃度與DNA的比例倍數(shù)是1,2，3，4、、、8 在4度下 TBE緩沖液中 80V 電泳 2.5小時 然后銀染 的 結(jié)果 我想問下 為啥 條帶都沒有了呢？？？？ DNA電泳圖.jpg |
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2樓2013-01-21 17:15:59
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3樓2013-01-21 17:47:00
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小丹木木: 金幣+3, 專家考核, 辛苦 2013-01-23 16:01:40
小丹木木: 金幣+3, 專家考核, 辛苦 2013-01-23 16:01:40
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覺的你樣品提取的有問題，或者確實藥物將DNA降解了，還有，從你泳道口的殘痕判斷，從你加藥開始的幾個條帶就有問題，加樣孔殘留過多，上下貫穿的黑條帶，排除電泳問題的話，應(yīng)該是DNA不規(guī)則碎片，各種長度都有，所以有長的帶，后面隨藥物濃度加大，似乎dna完全被降解，跑出泳道了， 建議重新提取樣品，采用新的試劑體系和電泳體系，如果還是同樣問題，很可能你的藥不止嵌合DNA，而且是將其降解，藥物濃度越大，降解越徹底。 不知道其它蟲友怎么解釋 |
6樓2013-01-22 14:20:34
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8樓2013-01-22 23:46:13
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10樓2013-01-23 22:14:17
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