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星星和太陽金蟲 (初入文壇)
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[求助]
小鼠胚胎干細(xì)胞的貼壁問題。
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| 各位蟲友們，是這樣，我在培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞，在代數(shù)比較低的時(shí)候，很容易形成EB，貼壁性能很差，隨著代數(shù)的增加，隨著分化，貼壁要稍微好一些，但是還是達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求，也用明膠處理培養(yǎng)板，現(xiàn)在就是想問一下，和大家交流，明膠處理之后需要用PBS洗培養(yǎng)板嗎？明膠對(duì)細(xì)胞有毒性嗎？明膠為什么能促進(jìn)細(xì)胞貼壁？還有什么辦法可以促進(jìn)細(xì)胞貼壁啊。 |
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2樓2013-01-22 16:56:31
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+3, 謝謝分享經(jīng)驗(yàn) 2013-01-23 08:37:57
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最好長(zhǎng)在mmc處理的MEF細(xì)胞上。如果一定不想用MEF，1%的Gelatin處理平皿也可以的。如果是用PBS溶的，不用洗。但注意gelatin處理的時(shí)候不要有蒸發(fā)，否則鹽濃度太高，會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)。 可以肯定地說，用MEF的話，對(duì)ES細(xì)胞要好的多。如果有MEF，細(xì)胞會(huì)成丘狀，在Gelatin上長(zhǎng)得話，細(xì)胞colony會(huì)長(zhǎng)扁平。 |
3樓2013-01-22 18:59:58
星星和太陽
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4樓2013-01-22 21:19:11
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